替尼类药物耐药机制及NO供体型化合物克服肿瘤耐药的研究.pfg.pdfVIP

替尼类药物耐药机制及NO供体型化合物克服肿瘤耐药研究 摘 要 背景-癌症是威胁人类健康的第一杀手，而化疗是癌症治疗的重要手段，在临床治 疗中由于多药耐药(Multidrug 物产生耐药性的原因和寻找有效的克服耐药的药物显得尤为重要。众所周知，人类多种 常见癌症中均有EGFR高表达，其中包括我国高发的肝癌，近年来分子靶向药物 EGFR．TKI开始试用于治疗晚期肝癌，个别药物取得了突破性进展，但是其潜在的耐药 问题值得我们关注：最近有研究显示NO能克服经典ABC转运蛋白介导的耐药。基于 以上两个方面，本研究旨在研究靶向EGFR的TKI艾洛替尼、吉非替尼和凡德他尼在肝 性和机制进行评价研究。 1．替尼类药物耐药机制 目的：体外建立人肝癌艾洛替尼、吉非替尼和凡德他尼耐药的细胞株HepG2／ 行初步探讨。方法：以逐步递增联合大剂量药物冲击方法，在体外连续诱导培养人肝癌 群体倍增时间，流式细胞术检测其细胞周期，以RT-PCR和Westernblot方法检测耐药细 对其耐药机制进行研究。结果：成功建立了人肝癌细胞靶向药物EGFR-TKI的耐药细胞 对紫杉醇保持敏感；耐药细胞倍增时间变长，流式细胞分析表明耐药细胞比敏感细胞S blot和流式细胞术检测， 期和G2／M期比例增高，Go／Gl期比例减少，经过RT．PCR，Western HepG2的基因芯片和双向电泳结果显示耐药细胞耐药性的产生可能与上调的基因或蛋 白有关，深入的机制研究还在进行中。结论：建立的人替尼类药物耐药的细胞株HepG2／ 药机制与细胞中BCRP蛋白的上调有关，也可能与鉴定出来差异基因或蛋白相关。 2．NO供体型化合物克服肿瘤耐药研究 目的：研究NO供体型化合物AB．19对经典耐药相关蛋白介导的耐药和相应敏感细 胞的细胞毒性，以及克服肿瘤耐药的机制。方法：采用MTS和SRB法测定对耐药及敏 用FACS检测AB-19对P-gP，BCRP逆转功能影响；Westem BCRP及相关信号通路进行检测。结论tNO供体型化合物AB．19对耐药和敏感细胞具 有较强的、相似的细胞毒作用，对肝癌细胞毒性大于正常肝细胞；对MDR-ABC耐药相 提供新的途径。 关键词lNO；肝癌：耐药；靶向药物 Ⅱ Mechanismsoftumorresistanceto--tiniband agents resistantcancer compoundagainstmultidrug cells Abstract a obstacletosuccessfulcancer resistance(MDR)is Background：Multidrug major the mechanismsof resistanceand ofnovel are to the drug investigationstrategy urgentlyrequiredimprove of MDR．The factor over efficacychemotherapeuticagentsagainst epidermalgrowth in human c种cinoma inour expressedmany Cancers，includinghepatocellularprevalence EGFR-TKI havebeentestedinadvancedliver targeted