乳酸菌和大肠杆对固定化犬肠道粘蛋白模型的粘附性研究.pdfVIP

摘 要 本研究采用双层琼脂法测定了两株犬源乳酸菌E01和E16对两株致病性人肠杆菌 细凶16SrDNA片段序列结果，鉴定犬源乳酸菌E01为耐久肠球菌(相似率97％)，E16为 乳酸肠球菌(相似率99％)。 采用固定粘蛋白模型，结合同位素]t_32p—ATP标记细菌法，检测犬源耐久肠球菌E01 和乳酸肠球菌E16、犬源人肠杆菌DE、鸡源德氏乳酸杆菌德氏亚种N11及猪源约氏乳杆菌 能力，结果所有测试菌株均能不同程度地枯附犬十二指肠、空肠、同肠、盲肠和结肠粘蛋白， 而且对不同肠段粘蛋白模型的粘附率不相同。其中耐久肠球菌E01粘附率最高，达15．60— 25．71％；人肠杆菌CVCC2060粘附率最低，为2．88—5．74％。两株致病性大肠杆菌ATCC 25922和CVCC2060在各肠段的粘附率都低于四株乳酸菌E01、E16、JJB3和N11。 以高碘酸钠和胰蛋白酶分别修饰犬源乳酸肠球菌E16和犬源人肠杆菌DE，探究其各自 粘附机制；另外以两种处理方式分别修饰粘蛋白后进行粘附实验，探究其各自粘附受体。两 种处理方式均使乳酸肠球菌E16的粘附比率显著降低(P0．05)，大肠杆菌DE经胰蛋白酶 处理后，粘附率也降低，但经高碘酸钠处理后粘附率无明显变化。说明乳酸肠球菌E16表 面的碳水化合物结构和糖蛋白参与了粘附过程，人肠杆菌菌体蛋白在粘附过程中发挥一定作 用。粘蛋白经胰蛋白酶修饰后，对乳酸肠球菌E16和大肠杆菌DE的粘附性均无影响，经高 碘酸钠处理后对乳酸肠球菌E16粘附性无影响，但大肠杆菌DE的粘附率显著降低(P O．05)。结果说明乳酸肠球菌的粘附受体对这两种试剂处理不敏感，大肠杆菌DE的粘附受 体具有碳水化合物结构，可能为糖蛋白类物质。 最后分别采用排斥、竞争和取代三种作用方式研究两株犬源肠球菌对两株致病性大肠 杆菌粘附的抑制作用。结果表明三种作用方式均能不同程度的抑制大肠杆菌的粘附作用，取 代和排斥两种方式能显著降低人肠杆菌的粘附率(P0．05)，但是，两株肠球菌的抑制效果 存在较人差异。试验结果表明两株犬源乳酸菌具有开发为预防和治疗犬消化道疾病的益生菌 潜力。 关键词：犬乳酸菌大肠杆菌粘液体外粘附 In 11 vitroaadhesionllesionofseveralLABstrastrains to intestinalmucus pathogenspuppy Wu Veterinary Meng(PreventiveMedicine) DirectedNi and by Xue—qinZengDong thesoft ofE01 andEl6was Abstract：Usingagarmethod，antimicrobialactivity tested．Bothofthetwostrainswereshownto inhibitionzone two produce against zoonotic sizeofthe zonewasbetween13mm-16mm．EO1 pathogens．Theinhibitory showedthe zone EscherichiacoliATCC25922．Intheother largestbyinhibiting hand， theDNA1 E ofEOand16wereextracted．The16SrDNA was sequencinganalyzed