不同毒力单增李特菌lipi-1全序列分析及致病性差异研究.pdfVIP

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2016-02-20 发布于贵州
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不同毒力单增李特菌lipi-1全序列分析及致病性差异研究

量皇曼墨曼量量曼曼鼍曼量曼曼量皇曼皇蔓皇罡曼皇曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼鼍曼曼景罡舅量皇皇鼍量量皇曼曩川洲…川洲川Ⅲ川川川JIJIJ川洲 —————————当坠_J㈣必幽必目录摘罩要……………………………………………………………………………………………………………………………………．I 英文摘要……………………………………………………………………………………………III 1前言………………………………………………………………………………………………………………………………～1 1．1单增李斯特菌概述……………………………………………………………………………1 1．2单增李斯特菌的致病机制……………………………………………………………………．2 1．2．1Lm在宿主体内的感染过程………………………………………………………………2 1．2．2Lm在细胞之间的感染过程………………………………………………………………2 1．3单增李斯特菌的主要毒力冈子………………………………………………………………4 1．3．1第一毒力岛(LIPI．1)……………………………………………………………………．4 1．3．2第二毒力岛序Y0fLIP!．2)…………………………………………………………………6 1．3．3Lm的其他毒力冈子………………………………………………………………………．7 1．4单增李斯特菌与肝细胞凋亡…………………………………………………………………7 1．5单增李斯特菌与免疫…………………………………………………………………………9 1．6本研究的目的和意义…………………………………………………………………………．．9 2材料与方法………………………………………………………………………………………11 2．1材料………………………………………………………………………………………………………………………～11 l 2。1．1菌种与实验动物…………………………………………………………………………．1 l 2．1．2主要试剂………………………………………………………………………………。1 2．1．3细菌培养基及增菌液配制……………………………………………………………．．11 2．1．4主要实验仪器与设备…………………………………………………………………一12 2．1．5主要生物分析软件………………………………………………………………………13 3 2．2试验方法………………………………………………………………………………………。1 2．2．1不同毒力单增李斯特菌一毒力岛基冈全序列克隆……………………………………13 2．2．2不同毒力单增李斯特杆菌遗传变异分析………………………………………………16 2．2．3不同毒力Lm毒力表型实验……………………………………………………………．16 2．2．4小鼠感染模型建立……………………………………………………………………。16 2．2．5 Lm在人J：感染小鼠体内的动态分布测定………………………………………………17 7 2．2．6Lm感染小鼠肝组织及脑组织病理学观察……………………………………………．．1 2．2．7TUNEL法检测Lm感染小鼠肝脏细胞凋亡…………………………………………．．18 8 2．2．8小鼠肝脏重要凋亡冈子mRNA荧光定晕PCR方法建立……………………………1 2．2．9荧光定鲑PCR检测感染Lm小鼠肝脏重要凋亡|灭l子mRNA表达量变化…………2l 2．2．10感染Lm小鼠血清