牦牛金属硫蛋白mts）-ⅲ-ⅳ分子特性及mt-ⅲ表达研究.pdfVIP

摘要 摘要 牦牛(Bos 具有很强的适应性，可能形成了保护中枢神经系统免受低氧损伤与氧化损伤的特殊机制。 金属硫蛋白(MTs)是一类低分子量、高半胱氨酸含量和富含金属的细胞质蛋白，具有重 金属解毒，清除自由基，保护脑细胞免受缺血缺氧性脑损伤，以及促进多种脑病理损伤修 复等作用。推测金属硫蛋白可能对牦牛适应低氧、强紫外线的高原环境发挥了重要作用， 列，采用生物信息学方法对牦牛MT圳和MT-|v蛋白质性质和结构进行了预测，并构建了 MT-川原核表达体系，主要获得以下结论： 1、 Accession No．：DQ492300和 牦牛MT-III基因转录区序列全长1484bp(GenBank EU653285)， 5’非翻译区、外显子1、内含子1、外显子2、内含子2、外显子3和3’ 侧翼区长度依次为56bp、31bp、232bp、66bp、817bp、110bp和172bp。 2、 结构域，不存在信号肽，是一种细胞内蛋白质。 3、 与人和鼠相比，牦牛MT-…基因编码区第88位的碱基T突变成A，使氨基酸序 有待深入研究。 20个，不含芳香簇氨基酸。与 和518bp。编码区长189bp，编码62个氨基酸，其中Cys tiT．I和MT·¨相比，在N端第四个氨基酸后插入了一个谷氨酸。MT-IV蛋白质分子量 6．25KDa，没有明显的疏水区，没有跨膜结构域，不存在信号肽，是一种细胞内蛋白质。 5、研究表明MT．IVmRNA在不存在复层扁平鳞状上皮细胞的器官肝脏、脾脏、脑和 脑垂体中也有表达，表明MT．IV可能不仅限于在复层扁平鳞状上皮细胞中表达，这有待于 深入研究。 牦牛金属硫蛋白(MTs)·III／-IV分子特性及MT·川表达研究 进化上高度保守，建立的系统进化树与比较形态学和生理学分类结果一致。但非编码区序 列同源性很低，这些序列可能存在物种特异性。 7、 结构域连接序列为RKS。 8、 采用pET一42“+)表达载体，BamH 合表达重组质粒，转化E．Coli 核表达体系。 关键词：牦牛，金属硫蛋白，基因结构，MT．III原核表达 2 Summary SUmillan， at The a bovine totheTibetan ofChina yakspecies(Bosgrunniens)representsunique speciesadapted plateau altitudesof abovesealevelwithintenseultraviolet tothis 3，000m radiation．Consequently，yakadapted environmenthave mechanismsto theircentralnervous likely specialphysiologicaladaptive protect systems andoxidative isaclassoflow molec