羧甲基壳聚糖的备与生物特性及其用于防止术后粘连的研究.pdf

中文摘要 羧甲基壳聚糖的制备与生物特性及其用于防止术后 粘连的研究 中山大学附属第一医院 专业：生物医学工程 博士研究生：陈浩凡 博士生导师：潘仕荣教授 摘 要 手术后组织粘连是结缔组织纤维带与相邻的组织或器官结合在一起而形成 的异常结构。自外科手术开展以来，人类术后粘连形成就成为一个棘手的问题。 在外科器械操作、技术以及大量防止术后粘连形成方法的发展取得广泛进展的今 天，术后粘连依然是临床的主要关注对象之一。粘连形成具有普遍性，是腹部、 妇科、矫形外科以及心脏手术后常见的临床问题。粘连也可以发生在耳、眼、胸 腔、心包腔、筋腱、脊髓等手术及腹腔透析术后。手术后组织粘连影响正常组织 的功能，增加了再次手术的困难以及进一步发生手术并发症：肠梗阻、骨盆疼痛、 不育不孕症等，严重影响外科手术的治疗效果：此外，它们还可能是胃肠道肿瘤 扩散的途径。术后粘连除了给病人带来痛苦，其经济代价是高昂的。有人统计过 与粘连有关的治疗费用，单在美国，每年直接经济损失大约20～40亿美元；因 此，寻找能成功预防术后粘连的方法变得十分迫切。 近年来，～个预防粘连形成的方法是物理屏障的使用，即把惰性材料置于组 织的切口部位之间，对纤维组织的生长起阻隔作用。长期以来，国外多采用明胶 海绵，自体脂肪，硅橡胶膜，透明质酸等作为隔离材料，防止粘连的发生，但它 们都因各自的局限而影响使用效果。明胶海绵会使成纤维细胞顺其蔓延或防碍脂 肪成活而使瘢痕粘连更为广泛；自体脂肪会发生液化坏死而诱发瘢痕生成，同时 供区会出现血肿感染和皮肤下陷等现象：硅橡胶膜确能减少瘢痕和粘连的生成， 但它不能被机体吸收，植入后作为异物长期残留体内，会对身体造成机械刺激； 中文摘要 透明质酸钠涂复容易，但是价格高昂，且晚期防粘连效果亦有限；聚四氟乙烯膜 必须被锚定，而氧化再生纤维素膜要求使用止血措施并且需要抽走过多的腹腔积 液。到目前为止，还没有哪种治疗方法在预防术后粘连形成上已经被证明过一律 有效的。但机械屏障的使用，为预防术后粘连提供了新思路。因此，寻找无毒性、 生物相容性好、具有特定的生物活性(如抑菌、止血作用等)、可生物降解材料 仍然是今后防止手术后组织粘连研究的热点。 壳聚糖是甲壳素的脱酰基聚合物，甲壳素大量存在于甲壳动物(如蟹、虾) 的甲壳中。壳聚糖作为一种新的具有独特生物活性的生物材料在医学界越来越受 重视。人们对壳聚糖基生物医用材料的重视基于以下几个主要因素：壳聚糖来源 丰富、无毒，无刺激性，无免疫抗原性，是生物相容性很好的植入材料：在体内 受酶的作用，降解生成无毒的小分子，容易被生物体吸收；此外它还具有双向调 节凝血功能、伤口的治疗、抗菌活性、选择性抑制人成纤维细胞生长，促进表皮 细胞生长的独特生物活性，这些都是新一代可降解的术后防粘连材料所必需具有 的性质。壳聚壳聚糖不足是只能溶于某些酸或弱酸性水溶液而不溶于中性及碱性 介质中，这在很大程度上限制了其理论研究与应用的深入。因此，壳聚糖在多数 情况下只能制成薄膜，这对于外型复杂的器官和组织，固定较为困难。此外壳聚 糖膜在早期还会延迟术后肌腱的愈合。经羧甲基修饰后的壳聚糖在水中溶解性大 为改善，可以涂复到伤口表面，使用更为方便；此外羧甲基壳聚糖(CMC)还具 有比壳聚糖更优越的细胞相容性。CMC作为术后防粘连材料是一个崭新的应用 方向。 本试验从材料学、细胞学、生物学、组织学等多学科系统地对CMC防止手 术后粘连的效果和机理开展细胞、分子、整体的相关研究。昔在减少手术粘连后 遗症，减轻患者痛苦，提高手术质量，为新一代可降解的术后防粘连材料的研制 和应用提供科学依据。围绕着本论文的研究目的，本研究主要探讨以下几个内容。 l不同取代CMC的制备及其结构测定 通过控制反应条件(反应路线、时间、温度、碱的浓度和投料比等)分别得 分子结构进行表征，用胶体滴定法测定CMC取代度；通过胶体滴定法、电位滴 Ⅱ