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石斛多糖的提取分离技术 Chapter1: 石斛简介 石斛属兰科石斛属多年生草本植物，全世界约有1 400 种，其中铁皮石斛是我国常见的石斛品种之一． 铁皮石斛具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖和降血脂等多种功效，现代药理学研究表明，石斛多糖是石斛中的主要功能成分。 Chapter2: 石斛多糖的提取方法 植物中多糖的提取方法： 溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、 超滤法、超声波强化法、微波法、 超高压提取法等。 1 超高压法提取石斛多糖 1.1UHP法提取DP原理： 在升压时，通过渗透作用，溶剂进入细胞内部，在此过程中细胞的结构在高压下受到不同程度的破坏。保压时，细胞内容物与进入细胞内部的溶剂接触，有效成分溶于这些溶剂中。在泄压过程中，细胞外部的压力减小为零，细胞内部的压力仍然保持平衡时的压力，即此时压力差与施加压力时方向相反。由于施加的是高压，因此这种反方向的压力差仍然是很大的，因此细胞壁变形而破坏，溶解了有效成分的溶剂泄出。 1.2UHP法提取DP过程： 1.3 结果与分析 2 石斛多糖超声提取方法 2.1 超声法提取原理 超声提取法是应用超声波强化提取植物多糖的方法, 是一种物理破碎过程。当超声波振动时能产生并传递强大的能量, 引起媒质以大的速度加速进入振动状态。使媒质结构发生变化, 促使有效成分进入溶剂中, 同时, 超声波在液体中还会产生空化作用。空化泡在瞬间涨大并破裂, 破裂时吸收的声场能量在极短的时间和极小的空间内释放出来, 形成高温和高压的环境, 同时伴随有强大的冲击波和微声波, 从而破坏细胞壁结构, 使其在瞬间破裂, 植物细胞内的有效成份得以释放, 直接进入溶剂并充分混合,从而提高提取率。 2.2 超声法提取石斛多糖工艺流程： 3 热水法回流提取多糖 3.1 提取原理： 溶剂提取法遵循相似相溶的原则，在所有溶剂中, 水是典型的强极性溶剂, 对植物组织的穿透力强, 提取效率高, 在生产上使用安全。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法, 该法所得多糖提取液可直接或离心除去不溶物; 利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质, 用高浓度乙醇沉淀提纯多糖。 3.2 热水法回流提取多糖工艺流程 结果分析 Chapter3:结果与分析对石斛多糖的提取方法对比分析 UHP提取方法:提取方法比较新，技术先进，提取出的多糖含量相对较高，提取时间短，操作相对较复杂； 超声提取法：提取方法比较新，技术先进，提取效率较高，优于水提法，提取过程中能量消耗大，提取时间花费较超高压提取法长； 热水回流法：是传统的多糖的提取方法，成本低，取材方便，提取条件易于控制，经济适用，操作方法相对简单但是繁杂，重复提取次数较多，提取时间过长，提取效率相对较低。 谢 谢！ * * 石斛简介 石斛多糖的提取方法 Chapter3 结果与分析 Chapter2 Chapter1 称取10 g 石斛粉，加水混合后装 入高压聚乙烯塑料袋，真空包装 放入超高压装置中进 行高压处理 处理后过滤得提取液，滤渣 继续提取2 次，合并提取液 3500 r /min 离心10 min 上清液真空浓缩，加无水 乙醇，调节到乙醇浓度70%， 静置4 h，收集沉淀。 测定多糖含量 计算多糖得率 多糖得率=提取得到的多糖质量/原料质量×100% 多糖含量：苯酚硫酸法 DP得率平均为19.27%。 原料粉碎度60目，固液比1:20，提取时间6min，UHP压力300MPa。 最佳提 取条件 经粉碎好的石斛粉100g，加 水后置不锈钢圆筒中 进行超声波水浴加热提取 (超声功率恒定为300W ) 离心5 000 r/min去渣 得上清液 上清液浓缩后，加无水乙 醇调节到乙醇浓度为95%， 静置8h 得到的沉淀物，加适量蒸馏 水溶解15 000 r /min离心 10 min沉淀 测定多糖含量 计算多糖得率 多糖得率=提取得到的多糖质量/原料质量×100% 多糖含量：苯酚硫酸法 最佳提取条件：固液比1:30， 提取温度50℃， 提取时间1.5h，超声波提取频率45KHz。 平均提取得率为15.3%，优于常规条件下水提多糖得率10.2%。 结果分析 取石斛10 g，加200 ml水， 混合后在60 ℃下浸提2 h 过滤得提取液，滤渣继 续提取2 次，每次 1 h，合并提取液 3500 r /min 离心10 min， 得上清液 真空浓缩，加无水乙醇， 调节到乙醇浓度70%，静置 4 h，收集沉淀 测定多糖含量，计算多糖得率 多糖得率=提取得到的多糖质量/原料质量×100% 多糖含量：苯酚硫酸法 热水浸提法最佳提取条件：温度80℃，固液质量比1:60，浸提时间3h，浸提次数3次。 在此条件下得到的铁皮石斛多糖得率为9.17%。