利血平增敏微生法检测三种氟喹诺酮类药物残留的研究.pdfVIP

摘要 为探索微生物方法检测氟喹诺酮类药物残留以及利血平增敏氟喹诺酮类药 喹诺酮类药物(恩诺沙星、环丙沙星和左氧氟沙星)残留的微生物法检测研究，并 用利血平增敏三种氟喹诺酮类药物残留的研究。 1．三种氟喹诺酮类药物残留检测微生物学方法的建立 1．1最适菌层浓度和培养基pH值的选择 本研究通过测定不同菌层浓度和不同培养基pH值时三种抗生素对五种细菌 的抑菌圈直径及清晰度来确定最适菌层浓度和培养基pH值。结果表明：在本实 验条件下，金黄色葡萄球菌的最适添加浓度为0．35％(5X106CFU／m1)、短小芽孢 杆菌的最适添加浓度为0．4％(6×106CFU／m1)、大肠杆菌菌悬液的最适添加浓度为 时可产生直径最大、边缘光滑、完整、清晰的抑茵圈。 1．2三种氟喹诺酮类药物在磷酸盐缓冲液中标准曲线 本研究分别制备了三种药物对五种菌在磷酸盐缓冲液中的标准曲线。结果表 明：各对照品于不同时间分别制备五组工作曲线，其斜率的变异系数均低于10％， 表明其变异程度小、重复性好。对各对照品的五组工作曲线各浓度抑菌圈直径的 校正值求平均值，并以此绘制标准曲线，抑菌圈直径与药物浓度的对数值呈正相 关，相关系数r2均大于0．998。 1．3三种氟喹诺酮类药物在磷酸盐缓冲液中最低检测限的测定 本研究根据所添加药物浓度可产生直径大于lOmm的、明显的、清晰的抑菌 圈为标准来确定最低检测限。结果表明：同一药物在不同菌种条件下，最低检测 限各有不同，恩诺沙星的最低检测限分布在0．063-0．13№／ml之间、环丙沙星的 最低检测限分布在0．25—2．Oug／ml之间、左氧氟沙星的最低检测限分布在 0．5—1．O睨／ml之间。 2．利血平混合三种氟喹诺酮类药物残留增敏法的研究 2．1利血平混合三种氟喹诺酮类药物在磷酸盐缓冲液中标准曲线的制备 结果表明：各混合液于不同时间分别制备五组工作曲线，其斜率的变异系数 均低于10％，表明其变异程度小、重复性好。对各混合液的五组工作曲线各浓度 抑菌圈直径的校正值求平均值，并以此绘制标准曲线，抑菌圈直径与药物浓度的 对数值呈正相关，相关系数r2均大于0．998。 2．2利血平混合三种氟喹诺酮类药物在磷酸盐缓冲液中最低检测限的测定 结果表明：同一药物在不同菌种条件下，最低检测限各有不同，利血平混合 1 恩诺沙星的最低检测限分布在0．0078-0．0 6№／ml之间、利血平混合环丙沙星的 最低检测限分布在0．010—0．063pg／ml之间、利血平混合左氧氟沙星的最低检测 限分布在0．016-0．13心／m1之间。 上述研究表明，本研究建立了利血平增敏氟喹诺酮类药物残留的微生物学检 测方法，RSD在10％以内；恩诺沙星、环丙沙星以及左氧氟沙星在利血平的增 敏作用下，其最低检测限分别下降6．10倍，有效的增加氟喹诺酮类药物的检出率、 提高微生物检测法的灵敏度，为初筛工作提供了科学的依据。 关键词：利血平．增敏．氟喹诺酮类药物，残留检测，微生物法 Ⅱ Abstract residues For which weredetectedmicrobiol Fluoroquinolones searching by were with andtheeffectionof exsensitived ogicalassay fluoroquinolones reserp detectablewerereduced．A micr ineand ofneminimal degree