培养雨生红球藻产天然虾青素的研究.pdfVIP

摘要 本文研究了培养雨生红球藻生产天然虾青素的技术及天然虾青素在肉鸡上的应用效果。 首先，建立了分离检测雨生红球藻中虾青素及其它色素的高效液相色谱法。以Nova．Pak C，。 mm 柱(300x3．9 I．D．，5 run)为分离柱，水、甲醇和丙酮为流动相，用二极管阵列检测器在250--700 nm波长范围内扫描，检测波长为476 nnl。虾青素、多种类胡萝p素和叶绿素在30 mm分离较好， 方法的精密度(RSD为o．09％r2．97％)和回收率(96．23％～102．47％)均较高。 其次，采用紫外线和／或甲基磺酸乙酯诱变处理雨生红球藻细胞．并用类胡萝h素生物合成的 抑制剂(烟碱、二苯胺、氟哒酮和氟吡酮)筛选突变株。发现用200Imaol／L烟碱筛选出的高产突 变株的虾青素含量达到2．49％，为出发株的2．II倍。连续转培4个月(每4天一次)．证明该突 变株遗传性能稳定。 通过测定培养物pH值、藻细胞生物量、叶绿索a和类胡萝b素含量，比较了6种培养基对 雨生红球藻生长的影响。在SM培养基中，培养物pH值变化较小(从7．07增加至8．20)，藻细 胞的平均生长速率、单位培养物的叶绿素a和总类胡萝h素含壁分别为o．28 d-1、2，83mg／L和1．39 mg，I，，比其它培养基中的相应指标高。 在20L气升式光生物反应器中进行了雨生红球藻的高密度培养。结果表明。光生物反应器 88 培养雨生红球藻的效果比三角瓶好，细胞增殖快，前4天平均生长速率为0 d．。．藻细胞密度达 cells／mL。 到6．57×106 最后，探讨了天然虾青素(雨生红球藻粉)对肉鸡肌肉着色、生产性能及机体抗氧化机能的 影响。选用360只1臼龄艾维茵肉仔鸡(公雏)，单因子随机区缀设计，分成5个处理，分别在 基础日粮中添加0、1、3、6、10mg／kg虾青素。结果表明，天然虾青索对肉鸡平均日采食置无影 05) 21日龄，胸肌的亮度和红色随日粮虾青素含量的增加分别呈线性降低(P0．01)和增加(P(0 的趋势，而黄色无显著变化(P0．05)；42日龄，亮度和红色随虾青素含量变化无显著改变 (胁-o．05)．而黄色呈线性增加的趋势(p0．01)；虾青素对血浆甘油三酯、总胆固醇、高密度脂 蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量以及血浆和肝脏中超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力和 脂质过氧化物含量无显著影响(尸o．05)。 以上结果表明，通过诱变处理并利用特定化合物定向筛选，可以获得遗传性能稳定的高产虾 青素的雨生红球藻突变株：气升式光生物反应器适合于雨生红球藻细胞的高密度培养，并能在其 中完成虾青索积累的诱导；虾青素可以改善肉鸡的饲料转化效率和胸肌色泽．而对脂质代谢和机 体抗氧化机能无显著影响。 关键词：雨生红球藻，虾青素，光生物反应器，诱变，高效液相色谱法 Abstract The ofthis includethe objectivcs study and ofnatural analysis，biosynthesis application astaxanthin from produced microalga,haematococcus