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- 2016-02-22 发布于贵州
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牛干扰素-τ基的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达
摘 要
本研究采用克隆测序技术,首次测定了中国荷斯坦奶牛干扰素一f(blFN-t)
并利用生物信息学方法对blFN.T的结构和功能进行了预测,结果表明:
进行聚类分析,可将其聚为4类,发现了新的一类blFN-x(z4)和六种新亚型(zle、
属于妇类的~种亚型,标记为x3L各bIFN-T基因核苷酸序列间的同源性在
物种IFN.f基因可聚为4类:普通牛与美洲野牛、水牛聚为一类;绵羊、山羊、
麝香牛聚为另一类;大额牛、马鹿、麝香鹿聚为第三类;长颈鹿单独为一类。各
物种IFN.T基因核苷酸序列间的同源性在84.6%99.2%之间,推导氨基酸序列间
种IFN.t基因核苷酸序列间的同源性在87.7%09.2%之间,推导氨基酸序列间的
同源性在74.1%-97.7%之间。对blFN.T的结构和功能进行生物信息学预测,发
是以5个a.螺旋为基础构成的,a.螺旋由111个氨基酸残基形成,占64.53%;
螺旋之间为无规卷曲,由61个氨基酸残基形成,占35.47%。blFN—T氨基酸序列
域。由此可以推测出blFN.t具有I型IFN所共有的抗病毒、抗细胞增生、免疫
调节等生物学功能。
优化表达条件,并初步纯化重组融合蛋白,结果表明:
正确:该基因已在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了融合表达,其
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