猪流行性腹泻病地方株ljb03株分离鉴定.pdfVIP

摘要 摘要 采用传代细胞(非洲绿候肾细胞)从猪腹泻粪便中分离出1株猪流行性腹泻病毒(Porcine diarrhea epidemic virus，PEDV)，命名为PEDVLJB／03株。该病毒接种Vcro细胞时，在其维 免疫荧光试验、间接ELI SA试验等方法对该分离毒进行了鉴定。实验结果表明：病毒盲传20代， 未出现明显的病变，第2l代48h出现可见CPE，72h收获病毒液。随着传代代数的增加，出现 CPE的时间缩短，细胞病变程度亦随之加剧。该毒株传到40代时。接种病毒的细胞产生规律性 病变，病毒培养24h，细胞肿胀变圆，折光性增强，颗粒物质增多；培养36h，细胞大量脱落崩 解，细胞间隙变大：培养48h，细胞脱落达到80％，细胞拉成网状，而对照细胞直到培养48h 还保持致密的单层，呈长梭形，轮廓清晰，细胞脱落极少。为进一步证明这种病变是由PEDV M基 所引起以及病毒在细胞中得以繁殖，本实验以每隔10个代次采用RT-PCR技术扩增PEDV 接免疫荧光实验结果表明，经PEDV感染40h后