猪繁殖与呼吸综征病毒m蛋白基因重组犬2型腺病毒活载体疫苗的构建及其免疫原性研究.pdfVIP

摘 要 报道的PRRSV美洲型部分毒株相比，M蛋白基因核苷酸的同源性为91．4=／=-99．8％， 推导的氮基酸序列周源性为92．1％一99．7％；遗传进化分析表明，见株M蛋白基因与 JL株与部分强毒株M蛋白有相似的抗原特性． 以感染性犬2型腺病毒全基因组为载体，构建了含有M蛋白基因的重组质粒 多酶切和PCR鉴定，表明获得了含M蛋白基因的重组病毒CAV-2．M；对重组病毒 CAV-2一M的遗传稳定性和M蛋白基因的转录和表达进行了检测。结果表明，重组病 毒在体外连续传代，性质稳定，没有出现外源基因的缺失和重捧；重组病毒感染细胞 后能够稳定转录和表达PRRSVM蛋白基因，具有良好的反应原性． 将重组病毒CAV-2．M采用肌肉注射接种2D日龄仔猪，定期对受试动物血清进行 检测。结果显示，重组病毒CAV-2．M能够刺激机体产生针对M蛋白的特异性抗体。 并可捡测到较徽弱的中和PRRSV活性；同时对受试动物外周血进行了淋巴细胞增殖 反应检测，结果表明M蛋白可以特异地刺激受试动物淋巴细胞增殖。 本研究扩增了PItRSV．JL株M蛋自基因，并获得了表达猪繁殖与呼吸综合征病 毒M蛋白的重组犬2型腺病毒，该重组病毒可以诱导猪体内产生针对P鼬峪vM蛋 白的体液和细胞免疫应答，为