白斑综合征病毒组蛋白对克氏原螯虾免疫效果的研究.pdf

摘要 本文通过口服、注射及浸泡三种免疫途径研究了白斑综合征病毒(WSSV) 重组疫苗对动物模型克氏原鳌虾(Procambarusclarkii)的免疫效果。采用原核 (大肠杆菌BE21)与真核(毕赤酵母GSl15)表达系统分别表达了WSSV的两 个主要囊膜蛋白VPl9和VP28，并以其作为重组疫苗研究抗WSSV效果。 Immunoblotting进行检测，均出现了明显的特异性条带，大小分别为21kDa(vPt9) 和28 达，SDS及Westem Immunoblotting检测其大小分别为22kDa(V_P19)和 35kDa(VP28)。 分别纯化VPl9和VP28的原核及真核表达产物，并将其作为重组疫苗进行 免疫效果的研究。采用三种免疫途径：11纯化的蛋白与颗粒料混合均匀后，作 为口服疫苗免疫鳌虾25天；2)用330raMNaCl将纯化的蛋白溶解后，进行皮下 注射连续免疫；3)用330mMNaCl将纯化的蛋白溶解后，进行浸泡连续免疫。 经口攻毒25天后，统计其死亡率。研究发现：1)通过注射途径免疫的鳌虾相对 VP28单独免疫组及VPl9和