盐生杜氏藻mak基因的克隆及对烟草的转化.pdfVIP

Y937291 中文摘要 促分裂原活化蛋自激酶(mitogen-activatedproteinkinases，MAPK)属于丝氨 酸／苏氨酸(Ser／Thr)蛋白激酶，存在于所有真核生物中，通过对丝氨酸／苏氨酸的 磷酸化修饰将上游信号传递至下游，对细胞周期的运行和基因表达具有重要调 控作用。近年来，越来越多的实验研究表明：MAPK在植物生长发育调节和抗 逆等生理过程中超重要作用。而现今逆境胁迫严重影响植物的生长，因此提高 植物抗逆性的研究有着极为重要的现实意义。本实验利用传统的同源克隆方法 成功克隆到盐生杜氏藻MAPK基因，并构建了植物表达载体pBll21．MAPK， 将其转入根癌农杆菌EHAl05中，然后通过农杆菌介导将其导入烟草中，并对 转基因烟草进行检测，借以初步探讨MAPK基因在烟草中的转化情况，为今后 在更多牧草上应用提供了依据。本实验内容和结果如下： 1．盐生杜氏藻MAPK基因的克隆 利用同源克隆的技术，从盐生杜氏藻中克隆到一条MAPK基因的eDNA片 段(297bp)，然后以该片段为基础，利用RACE技术构建其全长序列。 2．植物表达载体p