bydvs编码两种抑制子及其作用机制研究.pdfVIP

摘要 dwallF 由大麦黄矮病毒(Badeyyellow 生，在我国小麦产区间隙性人发生，威胁小麦的生产。为最终达到防治该病害的目的，各国的科 学家们对大麦黄矮病毒的基因表达、进化、传播介体与寄主的相互作用等方面开展了深入的基础 研究。筛选鉴定出BYDVs基因组中可能存在的沉默抑制子，可为研究BYDV基因与寄主的互作提 供新的证据。 的严谨性，本实验新构建了pGO—GPV-UTR—PO重组载体；其次实验通过重复沉默表型观察证明 pBin-mGFP5．ER共浸润叶片后GFP pBin-mGFP5．ER共浸润叶片后GFP 的积累水平高。而作为RNA定量标准的内参基冈EF．1．a的mRNA水平在不同浸润组合的植 blot 和GFPmRNA、silⅢA的Northern 蛋白的表达量和GFP 抑制子的GFP蛋白的表达量以及GFP 在侵染16天后对非浸润叶片进行了Northern PVY的HC—Pro一样能抑制由GFP正单链RNA引起的系统性基因沉默。 此外，为研究BYDV的基因组结构中基冈突变(插入、缺失、重复等)对病毒复制和表达 策略的影响、验证病毒的蛋白功能以及确定重要功能结构域，建立BYDVs侵染性eDNA克隆 启动子控制下)和pGD-06KMl4全长基因组侵染性克隆载体，‘分别进行基冈枪转染小麦幼胚或 农杆菌侵染本生烟以获得具有侵染性的植株。目前实验已获得似BYDV症状的植株，侵染活性 验证实验正在进行当中。 关键词：大麦黄矮病毒，基冈沉默，沉默抑制子，侵染性eDNA克隆 Abstract Wheat dwarfdiseasecaused dwarf yellow bybarleyyellow place occurs inchina’Smain wheat worldwide，andintermittently wheat—growingarea，threateningproduction． thefinal of and this havecarriedout Toachieve purposepreventingcuringdisease，scientists in-depth on theinteractionbetweentransmissionvectorandhostin researches geneexpression，evolution，and dwarf out inBYDV Call badeyyellow virus．Screeningsilencingsuppressorspossiblypresent genome and newevidenceforthe ofinteractionbetweenBYDV thehost． provide study genes Through detection．ORF6inBYDV-GAVandP0inBYDV-GPVhavebeenidentified preliminary that have this materialsare mey silencingsuppressoractivity．Onbasis，experimentaloptimizedfirstly, andsixrecombinantvectors ofGPVwith asvectorand ofGAVwim PO，CP,MP