枯草芽孢杆菌s16抑制核盘菌形成活性物质的鉴定及其相关功能基因的克隆.pdfVIP

摘 要 向日葵菌核病是由核盘菌(Sclerotinia Bary．)侵染所引起的 sclerotiorum(Lib)de 一种向日葵毁灭性病害。目前，抗病品种选育、农业防治、化学防治等对该病害均无 有效防治效果。因此本课题组从生物防治着手，对向日葵菌核病的防治进行了系列的 研究。以课题组已分离得到的，对核盘菌(S 孢杆菌S．16为材料，对其抗茵活性物质的理化性质、气体抑菌物质的组分、不同的 行电击转化，构建突变子库；同时对突变子的生物膜的形成能力进行了研究。目的是 找到抑菌物质产生的相关基因，为枯草芽孢杆菌工程菌的改造提供一定的理论依据。 具体研究结果如下： 1．构建了3000个突变子库，并从中筛选到了3株丧失抑菌能力的突变子；同时 也筛选到l株丧失产生气体抑菌物质的突变子；从随机挑选的200株突变菌株中找到 6株丧失形成生物能力的菌株。 mL(100 2．抗菌活性物质理化性质的研究。40 mL三角瓶)的装液量，分别以葡 萄糖和牛肉浸膏为碳、氮源时最有利于抑菌物质的产生，同时S一16的抑菌粗提物的 抑菌活性最高；抑菌物质的热稳定性较高，对蛋白酶较为稳定，较耐酸不耐碱，紫外 照射处理对于抑菌活性的影响不明显。根据以上结论，初步推断枯草芽抱杆菌S．16 的抑菌物质的主要成分为脂肽类物质。 2一Hexynoic 成菌丝稀疏，但是不会影响菌核的形成。实验结果表明，抑菌气体中含有多个可以抑 制核盘菌菌丝和菌核形成的成分。 4．不同培养条件对核盘菌生长的影响。核盘菌gt长最适的培养基是PSA，最适的 碳源、氮源分别为蔗糖和硝酸铵，在以碳酸铵为氮源培养的核盘菌，菌丝，li长情况较 差，其培养条件卜．的核盘菌并不产生菌核原基和菌核。核盘菌的生长情况随着培养基 体积和含糖量的增多。偏酸‘陛条件下较有利jj-核篇‘菌茼丝的生长及荫核的J^二￡E，其中， pH6为最适宜核盘菌，上长的pH。 关键词：枯草芽孢打简S一16；抑蔺物质；mini—Tnl0：突变子；7卜物膜 GeneandIdentificationof oftheBacteriostatRelated Cloning 16 fromBacillussubtilisSm Substances Antifungal Abstract Sclerotinia Sunflowersclerotiniaisa diseaseinfected devastating by control、 isnoeffective andcontrolmeasures．Chemical present，there prevention controlandmultiresistanceselective didnotachieve agricultural variety breeding good isfocus inthe ofcontrolsunflowersclerotinia．So，this controleffect process experiment