盐生植物盐角草番杏nalt;#39;+gt;hlt;#39;+gt;逆向转运蛋白基因克隆及特性研究.pdf

擅 耍 植i尊 ㈣ 盐胁迫主要由Na+引起，过高的Na+浓度引起的离子毒害、渗透胁迫和K+，Na+比率 的不平衡使植物新陈代谢异常，从而对大多数器官造成伤害。Na+，H+逆向运输蛋白催化 Na+和H+的跨膜逆向运输，是植物抵御盐分胁迫的一种主要方式，对植物的耐盐性起重 要作用1对于植物Na．／H+逆向转运蛋白基因的克隆、表达、结构与功能的分析，有利 于在分子永平上详细了解该基因。从而促进植物耐盐基因工程的进展。本研究基于此目 Na+／H+逆向转运蛋白基因的分子克隆工作。r 根据GenBank中Nr／H+逆向运输蛋白基因的同源序列区域设计简并引物，利用 reading translated frame，ORF)，491个碱基的5’非翻译区(nonregion,NTR)，443个碱基的3’非 翻译区和51个碱基的多聚腺苷酸尾。此eDNA编码一个561个氨基酸的多肽，推测分 子量为62．1KD。克隆的盐角草Na+棚+逆向运输蛋白的氨基酸序列与植物中已经报道的 北滨藜、水稻、拟南芥、柑橘、小麦的Na+／F／+逆向运输蛋白同源性很高，分别为88％，74％， 77％，78％。63％。Southern 分析表明SeNI-IXl在盐角草对照植株的茎中有表达，经NacI和ABA诱导后表达量增加， 但是在根中诱导前后均没有表达。该基因己在GenBank注册。登录号为AYl31235；并 己申请专利，申请号8。 ‘ translated frame，ORb)，91个碱基的5’非翻译区(nonregion,NTR)，413个碱基 reading 的3’非翻译区和31个碱基的多聚腺苷酸尾。此eDNA编码一个552个氨基酸的多肽， 推测分子量为59．5KD。TtNHXl的氨基酸序列与已克隆的北滨藜、水稻、拟南芥、柑橘、 小麦Na十，H+逆向转运蛋白具有很高的同源性，分别为76％，61％，70％，65％。61％。 Southern blotting分析表明TtNHXl在番杏基因组中有2到3个拷贝。Northernblotting分 注册．登录号为AF527625；并已申请专利。申请号8。y 酸水平还是在氨基酸水平都具有很高的同源性，分别为71％和85％。SeNHXI、TtNHXI 具有12个跨膜区。且跨膜区是高度保守的。SeNI-DH与TtNHXl的氨氯吡嗪嘧的结合位 泡型的Nf／H+逆向转运蛋白基因一SeNHXl、TtNHXl基因在盐处理下表达量增高。表明 这两个基因均受盐胁迫诱导。＼i | 关键词：SeNI-1X1：TtNttXl：Nf／H+逆向转运蛋白；耐盐性；盐角草(Salicea 盐生植物 一L》、番杏(乃船伊确r矗咿霹孤柳画％Qj； ⅥI 耋I!窒些查兰蝥兰堡圭耋堡鎏三 ofNa’嚼 andcharacterization Cloning fromSalocorniaL．and antoportgenes europaea Abstract of