多沙唑嗪对映体在动物心血管系摘要.pptVIP

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  • 2016-02-24 发布于湖北
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多沙唑嗪对映体在动物心血管系摘要.ppt

多沙唑嗪对映体在动物心血管系摘要.ppt

Agilent 1260 液相色谱系统(荧光检测器,四元泵,自动进样器) 色谱柱:Ultron ES-OVM手性柱(150 mm × 4.6 mm i.d., 5 μm, Shinwa, Japan) 流动相: 磷酸盐缓冲液(20 mM, pH 5.32)-乙腈 (86: 14 v/v) 流速: 1.0 mL/min 柱温: 30 °C 检测光谱:激发波长255 nm,发射波长385 nm 哌唑嗪, (-)DOX 和(+)DOX保留时间分别为6.2 min, 10.0 min 及 11.3 min. 色谱条件 血浆蛋白浓度分析 BCA?蛋白含量检测试剂盒(Multisciences Biotech Co. Ltd, Hangzhou, China)分析混和血浆蛋白浓度. 试管中加入50ul稀释血浆(稀释100倍)及Bradford 试剂(1.5 mL) ,37°C 震荡混匀。 TU-1901 UV-VIS 紫外分光光度计在562 nm处测吸光度。 以BSA 制作标准曲线测定样品的蛋白浓度。 蛋白结合研究 平衡透析过程 依照说明书准备半透膜:煮沸去离子水浸泡20 min, 30% 乙醇浸泡20 min. 去离子水冲洗, PBS浸泡 60min. 500ul 血浆置于2cm长半透膜透析袋中,两端结扎,透析袋放入5 mL试管(内含 200, 400 or 800 ng?mL-

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