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嗜酸乳杆菌所产菌素特性的研究

嗜酸乳杆菌所产细菌素特性的研究 摘 要 本研究比较了分离细菌素常用的方法,结果采用饱和硫酸铵法提 WS所产生的细菌素。并研究了培养时间和培养温度 取L.acidophilus WS分别经 对该菌株所产细菌素的影响,其结果表明:L.acidophilus 分,经SDS.PAGE检测电泳带只有一条,即产物只有一种。L. aeidophilus 通过检测得知35、37、39℃培养后,得到的细菌素产物只有一种(定 素产生(定为组分2、3),且分子量较大。 WS所产细菌素的特性,本试验还对该细 为了了解L.acidophilus 菌素进行了定性分析。首先通过SDS.PAGE来检测该细菌素,其电 泳的基本参数如下:含6M尿素的双层胶(条件为:分离胶浓度T为 16%,胶联度C为6%:浓缩胶浓度T为5%,胶联度C为3%;尿素 6M)分离比较理想,且产物较单‘一‘。采用分阶段恒流的方式来控制 电压和电流,即将电流调节到15mA开始运行,当电流降至10mA时 再将电流调节到15mA,直至电泳走完为止,全程共需要2hr作用。 uL。通过利用毛细管电泳对 浓缩至培养液的百分之一时上样量为20 WS在45℃所产细菌素进行分析,结果表明:分别是在 L.acidophilus 0.1 时间为5.51min、9.37min和18miri时出现三种组分,与利用 SDS.PAGE检测的结果相同,均可证明在温度升高时有新物质产生。 其运行电压为10kV,进样方式为气动进样。 本试验用SDS.PAGE和毛细管电泳两种分析手段对上. aeidophilus WS在45℃所产细菌素的组分中,组分1的分子量范罔为 kDa。通过 2.512~3.5kDa;组分2、3的分子量范围为16.949~66.2 WS在37℃产生的细菌 12lMB型氨基酸自动分析仪对L.acidophilus 素进行分析得出:非极性疏水氨基酸占56.1%,说明该细菌素属于乳 酸菌所产生的细菌素中第二类(只按热稳定性分)。 WS在37℃所产细菌素 用平板挖井法和液体法对三.acidophilus 做抑菌试验,结果表明:该细菌素对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰 氏阳性菌有明显的抑制作用,而对以大肠杆菌为代表的革兰氏阴件菌 的抑制作用不明显。对细菌素做热稳定性试验,其结果为£. WS在45℃所产细菌素中分子量较小的组分1能经 口cidophilus 70℃20min的处理。 WS在37℃所产细菌素做了蛋白酶敏 本试验还对£.acidophilus 感性和酸度对细菌素活性影响的研究。结果表明:该细菌素对木瓜蛋 白酶(Papain)、蛋白酶K(Proteinase 敏感,而对中性蛋白酶(Subtili 性差。在~定的范围内,细菌素的抑菌活性和环境的酸度呈正相关。 关键词:嗜酸乳杆菌,细菌素,特性,分析,研究 STUDY ONCHARACTERISTlCSOFBACTERIOCIN PRODUCEDBYLactobac||lusACIDOPHILUS ABSTRACT with some Comparing presentlyseparatingbiologicproducts methodsin ammon

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