lab-3间接凝集反应检测血清类风湿因子.pptVIP

一 教学要求 学习凝集反应的类型及原理 掌握间接法检测血清类风湿因子的方法 二 实验原理 (1)凝集反应原理 细菌和细胞等颗粒性抗原与相应抗体特异性结合后，在适量的电解质存在下，可以出现肉眼可见的凝集现象，并将此种反应称为抗原抗体的凝集反应。根据检测凝聚反应的条件可将起分为玻片法，试管法和微量法。根据试验中抗原与抗体的检测方式分为2类：a.直接凝集反应，颗粒性抗原与抗体直接反应而凝集；b.间接凝集反应，将可溶性抗原事先吸附或偶联于与免疫无关的颗粒载体表面，制成致敏载体颗粒，再与相应抗体反应。 此方法比较简单，但因敏感性较差，一般只用在颗粒抗原免疫后抗体效价的检测、血型配型检测和细菌检测等方面。 （2）间接凝集反应检测类风湿因子原理 类风湿因子（RF）是由于细菌、病毒等感染因子，引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种自身抗体。目前已知有四种类风湿因子，即IgM型、IgA型、IgG型、IgE型。其中IgM和IgA类风湿因子易于检测，而IgG类风湿因子难于测出。IgA类风湿因子及IgM类风湿因子对类风湿关节炎诊断有较好的参考价值。 一般医院主要采用乳胶凝集法和酶联免疫吸附法测定类风湿因子。 将IgG吸附于聚苯乙烯胶乳上，RF与其反应可产生凝集现象。 三 材料与器材（略） 四 操作步骤 （1）在3块载玻片上分别加一滴RF阳性血清、RF阴性血清及待检血清。 （2）加20ul IgG致敏的胶乳于各血清样品中，轻微晃动载玻片混匀。 （3）1 min 后观察凝集反应发生情况 五 注意事项 （1）器材要洁净、血清要新鲜、以确保结果可靠 （2）注意阴性、阳性对照的设立 （3）注意血清及致敏胶乳加样量的比例 六 思考题 （1）记录试验结果并进行分析 （2）探讨影响实验结果的因素 * * 实验三 间接凝集反应检测血清类风湿因子