-和核段提取和电泳技术摘要.pptVIP

* 核酸的凝胶电泳 DNA和RNA的提取 分子杂交 细菌转化 第六章 基因操作中大分子的分析 1. 带电荷的分子在电场中会以一定的速率向与其电荷性质相反的电极移动，速度称为电泳迁移率。 2. 电泳迁移率同电场的强度和分子本身所带的净电荷数目成正比。 3. 电泳迁移率同分子与介质的摩擦系数成反比。 一、电泳的基本原理 第一节 DNA的凝胶电泳 4. 如果电场强度一定（电压和电极距离）、电泳介质相同（电泳液和凝胶）： 分子在电场中迁移的速度主要取决于分子本身的大小和形状。 形状相似的分子的迁移速度主要与分子量相关: 分子量越大，移动越慢。 摩擦系数主要与分子的大小、形状以及介质的粘度有关。 5. 通过琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳 1、测量核酸分子大小 2、检测核酸分子的量 3、检测核酸分子质量 二、电泳目的 三、琼脂糖凝胶电泳 1. 琼脂糖 2. 琼脂糖凝胶 琼脂糖在水里（或电泳液）中加热到沸点后溶解，冷却后又凝固成均匀的的胶体“胨”。 是一种线性多糖聚合物，从红色海藻产物琼脂中提取而来。 琼脂糖的浓度决定凝胶的空隙（密度）。 浓度高 空隙小 50000—1000 20000—1000 6000—300 0.3 0.7 1.4 分离DNA的片断大小（bp） 琼脂糖的浓度（%） 空隙小，分辨率高： 小分子较易通过，而大分子难通过；