玉米弯孢菌的硝盐营养缺陷型（nit）突变体筛选及营养体亲和性研究.pdfVIP

摘 要 通过筛选硝酸盐营养缺陷型(Nit)突变体，利用营养体亲和技术，对20个弯孢菌株 (Curvularia spp．)，其中14个来自四川省，山东省2个，河南省1个以及分离自水稻的 3个菌株的群体多样性进行了初步研究，内容主要包括：1．玉米弯孢叶斑病菌硝酸盐营 养缺陷型mit)突变株的产生条件及其稳定性检验2．突变体生理表型的鉴别3．供试菌 株的营养体亲和性测定及亲和群的划分，其结果表明： 野生菌株的生长情况对获得Nit突变体很重要，活化时间不宜太长，一般3—5d为 宜，幼嫩菌丝易获得Nit突变体；在利用含氯酸盐的诱导培养基方面，诱导效果在菌 株间有所不同，其共同点是，利用PDC培养基均不易获得Nit突变体，而KPS培养基 适用范围较广；氯酸盐的浓度太高不利于突变体的筛选，1．5-2．5％较为合适，该范围 内不同测试株要求的适宜浓度不同；比较25。C和29。C下产生Nit突变体的结果表明， 25。C较适合于弯孢菌Nit突变体的筛选：光照条件对筛选无明显影响；来自水稻的弯 孢菌株在各种条件下Nit突变体的出现频率均很低。 对20个供试菌株的所有Nit突变体进行了稳定性检验，发现其稳定率在74．4— 91．7％之间，说明弯孢菌的Nit突变体具有高的稳定性。 根据突变体对不同氮源的利用情况，对所获得的1848令Nit突变体进行生理表型 体所占比例极小(1．2-9．5％)，且两种类型的突变体所占比例在菌株间有较大的差 异。33—4、三台、单w一4菌株及采自水稻的3个弯孢菌株均未获得NitM型突变体。 根据Nitl和NitM突变体间的互补情况，测定弯孢菌的营养体亲和性，结果表 明：除33—4、三台、单W-4菌株及采自水稻的3个弯孢菌株，其余14个供试菌株均为 营养体自身亲和性菌株；通过菌株间营养体亲和性的测定，将33—4、Ca、C7及R2—5 亲和群(VCGz)，Rye．1、R3．2菌株既不属于VCGI，也不属于VCG2。 本研究还借助于野生菌株在PDA上的配对情况，将供试菌株分为另两个营养体亲 7，其余菌株属VCG2’。 和群(VCG。’和VCG。’)，33．4、Rye．1、R3．2菌株属VCGl 由此可以看出，两种方法的测定划分结果有所不同，但其结果均表明，四川省玉米弯 孢菌的群体组成存在多样性。 关键词： 玉米弯孢叶斑病菌硝酸盐营养缺陷型(Nit)突变体营养体亲和性营 养体亲和群(VCGs) 2 前 言 在我国，玉米是主要的粮食作物之一，其种植面积仅次于小麦和水稻，单位面积 骜产羹瞧屠泰谷类佟搦翡首链。困箕蒸有翡褥殊品震，且生产残本较低，莲涨豫{皋为 粮食作物，还广泛用于医药、化工和纺织工业等领域。因此，发展玉米生产已成为世 界农、监发震豹一大趋势。但怒，由于瘸害韵影响，导致玉米的产量和品质严燕下降， 绘玉米生产带来了很大鲍尽难。裂毽翦，在玉洙上发现的癍窖已达30多秘。 玉米弯孢叶斑病墩早由Nablson(1956)报道，之后在泰圈、巴西、意大利、南斯 控夫等卡恧令滋家也穗继报道饔该瘸靛菱生、燕害。在我嚣，玉米弯孢砖斑瘸是遥A 年发现的一种新病害fl-3】。但由于该病发展蔓延很快，因此已在相当多的地区和省份有 囊笈生、势造成不露稳廑静蔻密窝豢失，特潮在华就、表就黪主要玉米产毯，该襄害 的发生面积逐年扩大，病情也渐趋加重，危害程度有超过大、小斑痫的趋势f4。】。曝 诧，玉米弯稳时斑病瞧弓l起了入稻豹广泛重视，有美该病酌研究工稼逡逐渐展开。在 国外，关于该病的研究主要集中在瘸原蕊生物学特性、秘子带菌、致病性及晶l申拭癍 性等方面玮112l。国内也开展了玉米弯孢病发生、发展瓶律【13㈣、该瘸的危寄症状、瘸 原、鑫秘撬性珏一。5。9l、及防治方法}2眦21等方露懿磅究工佟。德到晷煎鸯止，还未霓毒 利用硝酸盐营养缺陷型(Nit)突变体的亲和蚀研究玉米弯孢蔚种群结构的系统报道。 玉洙弯魏盼斑瘸又秘援#舞斑瘸、漂霉痰、蒌岽螺霉癌等，主要霞玉米戒拣蓑箍寄 其叶片。受害初期，叶片出现水浸状褪绿的半透明斑点，后期逐渐扩大成为椭圆形、 舞蓠形、棱形成长条形。瘸凝牢；玉舞巍鑫惫，透缘呈现黄福镪或经褐色，外爨寿淡黄 空气潮湿时病斑两面均可产垒分生孢