茧蜂分子系统学步研究.pdf

1 福建农林火学2003届硕L学位论义 中文攘癸 茧蜂是农林害虫重要天敌，开展生物防治的有益资源。世界各=}Ill傈存 了大量的茧蜂标本，为了充分利用标本这～潜在的遗传资源，必须快捷、 离效、低成本媳提取基因缀DNA，以镁旋分子水平上研究物秘的起源、 系统迸{乞，生物多群性及天敌的gl遗、僳护、释放等。 I．本文探讨了高温，氧化，化学修饰筹影响茧蜂标本基因组DNA降 瓣的因素，列‘室内保存寄生蜂标本提出庶用含50mmol／L乙二殿四乙酸 (EDTA)熬纛承乙醇固定，劳在滚蘸鬟藏石蟮涵等哥行瞧建议。 2．通过对激蜂标本DNA几种提取方法的比较发现，十六烷錾三三乙基 Bromide，CTAB)法效果最好。本文 澳化铵(Cetyltrimethy|Ammonium 在藏鸯CTAB法基毯上进嚣了菠避，接穗貔纯豹方法霹以麸豫存滋20年 的乙醇浸泡标本中提取出DNA，该基因缀DNA可缀好地用于RAPD+PCR 扩增。针插干标本DNA提取有待于进一步探讨。 3建立了泼蜂RAPD分橱豹技术体系：251．tl反应体系中，含10mmol／l mmolflKCl，2．5mmol／l dNTP, iris-HCI(PH8．∞，50 MgCt2，1 509mol／l O．29mol／l随机引物，30-60ng模板DNA，1．5UTaqDNA聚合酶。反应程 序为：94℃预变性4min；94℃15s，36C45s，72℃90s，45个循环；72 ℃维持4min。 4．在12个供试材料中，亚科之间具脊多态性。对蚜茧蜂亚科下的4 个属进行RAPD分析，25引物麸扩增出159条带，多悉条带比率(PPB) 灸75％。较_瀑RAPD标记数撼，对蚜茧蜂泛秘辱令覆供试楗秘遂褥了蒙 lIaliday和孔蚜菔蜂属 类分析，结襁表明：全脉茧蜂属Ephedrus FovephedrusChert关系最j眨，他们首先聚类在一起，然后和蚜蘸蜂属 ‘ 与传统分类的结果相比分予系统发育关系基本相同。 关键词：茧蜂；标本保存；DNA提取：RAPD；系统发育 Abstract of andbenefit Parastic are enemies important pest Hymenoptera resourcesforbiocontr01．Inordertomake useof resourceof good heritage need of DNA．Then genomic parasticHymenopteraspecimen，wehighquality wecan the evolution，biologydiversity, study speciesorigin，system insect ofinsect ofinsect introductionof