20110305第三章 免疫球蛋白.ppt

IgD： 正常人血清IgD浓度很低， B细胞表面膜表面的主要免疫球蛋白（ mIgD） 第四节 免疫球蛋白基因及抗体的多样性 一，免疫球蛋白的生物合成及免疫球蛋白基因 Ig基因库： H：V ，D，J , C 基因 Κ λ V，J，C基因 抗体多样性产生机制 组合多样性 连接多样性 体细胞高频突变 Ig类别转换（class switch） Ig类别转换（class switch）：指B细胞在受抗原刺激后，首先合成IgM，然后转为合成IgG等。 因为仅为B细胞的CH基因片段发生重排，V区相同，所以识别抗原的特异性不变。 二，免疫球蛋白产生的一般规律 * 初次应答 潜伏期 对数期 平台期 下降期 * 二次应答 1. 潜伏期短 2. 抗体浓度增加快 3. 达平台期快、平台高，时间长 4. 下降期持久 5. 用少量抗原刺激即可诱发二次应答 6. 产生的 抗体主要为I gG 7. 抗体的亲和力高 第五节，抗体的人工制备 大多数抗原分子具有多个抗原决定基或称表位（epitope），每一种表位均可刺激机体一个B细胞克隆产生一种特异性抗体。传统制备抗体的方法是用包含多种抗原决定基的抗原物质免疫动物，从而刺激多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。因此，所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，称为多克隆抗体(polyclonal antibody，pAb)。 （一）多克隆抗体： 传统抗血清 抗 原 免 疫 所有抗体混合 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 脾 脏 淋巴結 B 細胞 传统抗血清的交叉反应 专一性反应 沒有反应 交叉反应 + - ? 1 2 3 Ag A x y z Ag B 1’ 2 0 Ag A’ 1 2 3 1 2 3 1 2 3 （二）单克隆抗体： 克隆是指由一个祖先细胞经分化、增殖所产生的遗传性状完全相同的细胞系或细胞群。 针对一个抗原决定簇，由一个B细胞分化增殖的子代细胞克隆而产生的抗体称为单克隆抗体（Monoclonal antibody，简称McAb）。 1975年，Kohler和Milstein采用细胞融合技术，使小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，后者即可产生只针对某一特定抗原决定簇的单克隆抗体。 单克隆抗体的特点: 可生产有用抗体的 淋巴細胞 若与 癌细胞融合，则形成稳定而可培养的细胞株。 癌细胞 可培养生长 浆细胞 B cell 可分泌抗体 融合瘤 Hybridoma Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y 细 胞 融 合 两组染色体混在一起 也可以培养生長 产生专一性抗体 一個 B cell 只 产生一种抗体 高度特异, 高度均一 可大量制备, 产量高 可长期保存 （三）基因工程抗体： 在基因水平对Ig进行切割, 拼接或修饰, 甚至人工全 合成后导入细胞表达, 产生的新型抗体。 包括： 嵌合抗体 重构抗体 单链抗体 单区抗体及抗体库 1 人一鼠嵌合抗体(Chimeric Antibodies) 人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。 Fv ScFv 单区抗体 最小识别单位 Fab 整体水平抗体生成技术 细胞工程抗体生成技术 基因工程抗体生成技术 多克隆抗体（抗血清） 单克隆抗体 嵌合抗体、改形抗体 “小型化抗体”（单链抗体） 组合抗体库技术 噬菌体抗体库技术 Ig基因转基因小鼠 抗体真核表达技术 第三章 免疫球蛋白 ( Ig ) 抗体（antibody,Ab）：机体免疫系统受抗原刺激后产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白。主要存在于血清等体液中，具有免疫功能。 免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）：是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 分泌型（secreted Ig, sIg）：主要存在于体液中，具有抗体的各种功能。 膜型(membrance Ig, mIg) ：B细胞膜上的抗原受体。 抗体 是对其抗原有极强专一性 的 魔弹 或 巡弋飞弹 研 究 以免疫转印法检测 特定抗原 医 疗 以毒素连结抗体攻击 病变細胞 检 验 以 ELISA 侦测特定 病原体 抗体药物销售趋势图 ● 至2000年底，在美国药品市场上生物技术药物有76种，其中抗体药物有15种。 ● 2003年治疗用单抗销售总额已超过52亿美元。 ● 2010年预计单抗销售额200亿美元。 ● 美国已占全球单抗市场90%—一支独秀。 ● 完全人源化单抗现有多个处于临床前阶段 第一节 免疫球蛋白的结构 一、免疫球蛋白的基本结构 Ig