利福平诱导小鼠脂肪肝实验模型的研究.pdfVIP

安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2015Jul；50(7) ·937 · 利福平诱导小鼠脂肪肝实验模型的研究 黄家惠 ，陈 熙 ，张 程 ，陶 莉 ，何 薇 ，齐 军 ，张大刚 ，徐德祥 摘要 目的 观察利福平 (RIF)引起的小鼠肝脏脂肪变及 主要有肝细胞死亡、脂肪变性、胆汁淤积、肝窦状隙 其动态演变过程 ，为进一步探讨药物性脂肪肝的机制奠定基 损害、肝纤维化与肝硬化、肝癌变等类型，其中药物 础。方法 将42只成年健康雄性 ICR小 鼠随机分为7组 性脂肪肝约 占药物性肝损伤的2％，并有不断增加 (对照组 ，RIF8h、24h、3d、1周、2周、4周组)，经灌胃给予 的趋势 ]。研究 4¨表明，抗结核药物是导致急性 RIF处理 (200ms／kg)，末次给药后禁食 6h处死小鼠，采集 药物性肝损伤的主要原因。前期研究 表明，单 血液及肝脏组织。计算肝脏系数；检测血清丙氨酸氨基转移 次或连续给予利福平 (rifampicin，RIF)均可诱发小 酶 (AIJT)活性；HE染色观察肝脏组织病理学改变 ；检测血清 中三酰甘油 (TG)、胆固醇酯 (TCH)、高密度脂蛋 白(HDL)、 鼠肝 内胆汁淤积，RIF所致的胆汁淤积与肝细胞紧 极低密度脂蛋白(VLDL)水平；检测肝脏组织中TG水平；油 密连接蛋 白ZO．1和occludin完整性破坏有关；连续 红O染色检测肝脏组织脂质沉积。结果 与对 照组 比较 ， 给予小鼠RIF1周可引起小鼠肝脏组织三酰甘油 RIF处理组小 鼠肝脏重量、系数均从 24h开始逐渐升高，4 (triglyceride，TG)含量明显升高，油红O染色也显示 周时达到高峰；与对照组比较 ，24h、3d、1周、2周组ALT水 小鼠肝脏组织中可见大量脂质沉积。但RIF对肝脏 平逐渐升高 ，4周组A 水平显著升高。HE染色显示 8、24 脂质代谢的影响鲜有报道，该研究旨在建立实验动 h组肝脏组织无明显变化，3d组可见小的空泡，而从 1周开 物模型的基础上观察RIF引起的小鼠肝脏脂肪变及 始出现显著增多的大的圆形空泡。8、24h组血清中TG和 其动态变化过程，为进一步探讨其机制奠定基础。 VLDL水平较对照组轻度升高，3d时升高最明显，而 1、2、4 周组中呈下降趋势，且显著低于对照组。RIF处理各组血清 1 材料与方法 TCH、HDL水平均较对照组降低。肝脏组织TG含量从 8h 开始明显升高，1周时达峰值，之后 2、4周组呈下降趋势但 1．1 实验试剂及仪器 RIF购 自美 国Sigma公司； 仍显著高于对照组。油红 O染色结果显示 ，8、24h组肝脏 丙氨酸氨基转移酶 (alanineaminotransferase，ALT) 组织中可见少量脂质沉积，从3d组开始出现显著增多的大 试剂盒购 自南京建成生物工程研究所；TG试剂盒购 圆形脂滴。结论 RIF能引起小鼠肝脏组织中脂质沉积，且 自浙江东瓯诊断产品有限公司。 呈明显的时间效应关系。 1．2 实验动物来源和处理 清洁级健康 ICR成年 关键词 小 鼠；利福平 ；脂肪肝；脂质沉积 雄鼠，4～5周龄，重2O～23g，购 自安徽医科大学实 中图分类号 R575．5；R978．3 验动物中心。实验前适应性喂养 1周，自由饮食、昼 文献标志码 A 文章编号 1000—1492(2015)07—0937—05 夜均衡，温度 20～25qC，湿度 (50±5)％，随机分为 7组：对照组