内皮素受体在不同毛色绵羊皮肤中的表达和定位分析.pdfVIP

中国农业科学 2010,43(24):5147-5154 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.24.019 内皮素受体在不同毛色绵羊皮肤中的表达和定位分析 1 2 1 1 1 1 1 1 耿建军 ，孙乐天 ，穆晓丽 ，张 杰 ，姜俊兵 ，张 映 ，李宏全 ，董常生 1 2 （山西农业大学动物科技学院，山西太谷 030801 ； 太原动物园兽医院，太原 030009 ） 摘要：【目的】研究内皮素受体 A 和 B（endothelin receptor A and B, EDNR A and B）在绵羊皮肤中的表 达与定位，以及在不同毛色中的差异比较，探讨其在绵羊毛色形成中的作用及其相关机制。【方法】以不同毛色的 成年绵羊为研究对象（设黑色毛和白色毛两组），用RT-PCR法检测EDNR 基因在不同毛色皮肤中的表达，并使用实 时荧光定量 PCR 技术分析不同毛色绵羊皮肤 EDNR 基因的相对表达量，采用免疫组织化学法和 Western blot 法对 EDNR 在绵羊皮肤中的表达进行定位和定量分析。【结果】荧光定量 PCR 结果显示黑色绵羊中 EDNRA 的相对表达量 是白色绵羊的1.2648倍，EDNRB的则是1.8248倍；Western blot结果显示，皮肤组织粗蛋白提取物中含有EDNR 蛋白，且受体A在黑白两组皮肤中表达不显著（P ＞0.05），受体B在黑色组的表达显著高于白毛组（P ＜0.05）； 免疫组化实验结果显示，EDNR蛋白在两组皮肤的表皮和毛囊中均有表达，通过光密度分析，受体A 在黑毛皮肤各 处细胞中的表达显著高于白毛皮肤，受体 B 则在除毛根鞘之外的其它两处细胞中表达显著高于白毛皮肤（P ＜ 0.05）。【结论】实验结果提示，EDNR参与绵羊皮肤黑素细胞的生成，且两受体作用效应存在差异。 关键词：内皮素受体；绵羊；皮肤；免疫组织化学；Western blot；实时荧光定量PCR Immunolocalization and Expression Analysis of Endothelin Receptor in Sheep Skin of Different Hair Color 1 2 1 1 1 GENG Jian-jun ，SUN Le-tian ，MU Xiao-li ，ZHANG Jie ，JIANG Jun-bing ， 1 1 1 ZHANG Ying ，LI Hong-quan ，DONG Chang-sheng 1 ( College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi; 2 Veterinary Hospital of Taiyuan Zoo, Taiyuan 030009) Abstract: 【Objective 】