蓝莓炭疽病病原菌鉴定及致病性测定.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(20):3992-3998 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.20.007 蓝莓炭疽病病原菌鉴定及致病性测定 1,2 1 1 1 2 1 徐成楠 ，王亚南 ，胡同乐 ，王树桐 ，周宗山 ，曹克强 1 2 （河北农业大学植物保护学院，河北保定 071001 ； 中国农业科学院果树研究所，辽宁兴城 125100 ） 摘要： 【目的】鉴定辽宁省部分地区疑似炭疽病的蓝莓病株的病原，为蓝莓病害的防控及抗病育种提供依据。 【方法】对采自辽宁省兴城市和庄河市的疑似炭疽病的蓝莓发病枝条及叶片进行组织分离、培养，从所分离获得 的两类菌株中选择形态学不同的代表菌株 LNSW1 和 B-Cg1 进行后续试验和分析。观察两个代表分离菌株在马铃薯 葡萄糖琼脂培养基（potato dextrose agar，PDA）上的菌落及分生孢子的形态特征。对代表菌株LNSW1和B-Cg1 的真菌核糖体基因进行 PCR 扩增和测序，采用 Mega5.1 软件中邻位加入法（neighbor-joining，NJ）进行基于病 原菌rDNA-ITS 基因序列和GenBank中已有相关炭疽菌序列的系统发育树构建。利用尖孢炭疽菌（Colletotrichum acutatum ）和胶孢炭疽菌（C. gloeosporioides ）的特异性引物对CgInt2/ITS4和CgInt/ITS4对代表菌株进行特 异性扩增，采用菌丝块叶片接种法对 8 个蓝莓品种进行代表分离菌株的致病性测定。【结果】从辽宁省部分蓝莓 产区罹病植株上共分离纯化得到36个菌株，根据各菌株的形态学差异将其分成两个类别，两类别中代表菌株LNSW1 和 B-Cg1 在菌落颜色及分生孢子形态上具有较大差异，且与已报道的炭疽菌属当中的尖孢炭疽菌和胶孢炭疽菌形 态特征相似；两个代表分离株的 rDNA-ITS 序列实际长度为 557 和 547 bp，通过基于真菌核糖体基因的系统发育 分析，表明菌株LNSW1与GenBank中尖孢炭疽菌菌株AB729126、KF698729、EU886755聚在同一分支，B-Cg1与胶 孢炭疽菌菌株JF923828、KF516931、GU174547聚在同一分支，相似度分别为99%—100%；两对炭疽菌特异性引物 扩增结果再次证明所获代表菌株分别为尖孢炭疽菌和胶孢炭疽菌; 致病性测定结果表明，尖孢炭疽菌和胶孢炭疽 菌菌丝块接种 8 个蓝莓品种的叶片及枝条均可致病，两类病菌回接症状与田间自然发病症状较为相似，尖孢炭疽 菌对蓝莓的致病稍强于胶孢炭疽菌。【结论】通过对辽宁省蓝莓主产区的蓝莓发病枝条及叶片的病原菌进行形态 学和分子学鉴定，基本明确辽宁省部分地区的蓝莓炭疽病是由尖孢炭疽菌和胶孢炭疽菌侵染所致。 关键词：蓝莓炭疽病；尖孢炭疽菌；胶孢炭疽菌；致病性 Identification and Pathogenicity of Pathogen Casuing Anthracnose on Vaccinium 1,2 1 1 1 2 1 XU Cheng-nan , WANG Ya-nan , HU Tong-le , WANG Shu-tong , ZHOU Zong-shan , CAO Ke-qiang 1