tamlo3基克隆与功能分析.pdf

．． 墅堡!!型丝薹里塞璧皇望鳇坌堑 一 __●_______●-_●-_____●●_-_______●●_______●___●__●-_--_-___-___-____———— 摘 要 | ／白粉病是造成麦类作物减产的主要真菌病害之一，在我国北方各主要小麦产区的发病 尤；扣重。由于病原菌生理小种多，变异快，品种抗性很容易丧失。而m／o基因是一类与植 物厂．谱高效抗病性相关的基因，它在大麦中首先发现，能抗白粉病几乎所有的生理小种· MLO蛋白作为一个钙调素结合蛋白在白粉病与植物互作的过程中起到一个抗性抑制因子眵 作用。对这一基因及其生物学功能的研究必将开拓小麦抗白粉病分子育种的新天地。／ 本研究根据大麦、拟南芥等植物中M／o基因的保守序列设计了多对引物。运用RT-PCR 氨基酸．其中包括5个跨膜区域、1个20个氨基酸的钙调素结合位点、1个核定位序列 (KKKVR)以及多个磷酸化位点。 用TaMl03基因3’的800bp片段做探针，对不同抗性品种麦类作物及感病品种不同诱 导时期的Mlo基因的表达情况做Northern杂交分析。结果发现抗病品种中M／o的表达车度 非常的低。而在感病品种中，其表达量在接种后6小时达到最低，以上结果表明M／o的表达 可能与抗性抑制相关。 另一方面。本研究采用胶体金标记方法对MLO蛋白的上游结合因子一钙调素在小麦与 白粉病菌互作过程中表皮细胞中的分布模式进行了细胞学定位研究。本研究结果发现，不同 抗病性细胞的钙调素分布变化明显不同。无论是抗病或感病的品种上，能够被成功侵染的表 皮细胞往往具有较高的钙调素含量。此外，在侵染后期，吸器外膜结构发生变化，大量钙调 素涌入吸器外基质中。以上结果说明，钙调素在保持细胞具有一个低浓度钙离子方面具有重 要作用。 关键词：小麦白菘螽／二基因寅莲／丢谪紊／免麦≤7 2 Abstract the Wheat Blumeria oneof major mildew,causedgraminis,is powdery by thatmake inthe and of inal[ disease qualitywheat，especially fungal drop production inthe thereiS diversifieddifierentiation thenorthchina．Because of highly pathogen and than30 raceshasbeen mass more identified，the changes physiological pathogen and iS ata the resistance rapidspeed variety easily a whichrelatedthe