控制稻瘟菌菌丝长基因的克隆.pdfVIP

摘 要 研究植物病原真菌的模式真菌之一。 通过筛选稻瘟菌的REMl转化体库，获得一个生欧缓慢型突变体$2514。在CM固体培养基 性状的比较。发现$2514不仅生长缓慢，而且在分生孢子形态以及致痛性上也发生了改变。与P13l 相比，$2514的分生孢子明显变短变粗，表现为孢子不成熟：而且完全丧失了对感病寄主丽江新 团黑谷致病性。通过遗传杂交确定突变体$2514菌丝生|殳缓慢、分生孢子形态变异以及致病性丧 失的突变表型是由于REMI转化过程中外源质粒的插入引起的。 通过Southern blot分析确定质粒在基因组中是单位点插入，并且通过质粒拯救获得了插入质 粒右侧的侧端序列。测序后与稻瘟菌的基因组数据库进行比较，确定这段序列位于Conti92．1938， 定位在稻瘟菌的第V条染色体上，插入位点在此Contig的6635的位置。而先前获得的插入质粒 左侧的序列位于Conti92．610，定位于第Ⅶ条染色体。插入质粒两端的序列被定位于两个不同的染 出质粒插入位置右侧的基因是一个编码656个氨基酸的基因。以侧端序列为探针筛选稻瘟菌基因 组TAC文库获得9个阳性克隆，从刚性克隆上得到包含完整基因的片段将用于构建互补载体， 通过互补实验证明质粒插入位置右侧的基因是控制该突变表型的基因。互补载体的构建以及互补 实验正在进行中。 关键词：稻瘟茁，菌落生长缓慢．REMI，质粒拯救，阳性克隆 Abstract blast infect the rice CaB funguscausing pathogenic manygrasses，is grisea,which Magnaporthe and between asa for interactions hasbeenusedmodel plantphytopathogenicfungi． disease．It studying isa mutant．On REMIlransformant Isolate$2514thatobtained libraryslow-growth by screening wild strain of$2514is45％ofthe theCMsolid rate type P131．Also，Isolate medium，hyphalgrowth with is amutantwithslow ratebutalso abnormalconidiaand S2514not growth pathogenic only hyphal