壳聚糖对肉鸡免功能的影响及其分子机理研究.pdfVIP

摘 要 本论文共分4个试验研究了壳聚糖对肉鸡免疫功能的影响及其机制。试验1～ 试验3利用体内法，采用单因子完全随机试验设计，将1日龄健康艾维茵肉仔鸡(公 母各半)240只，随机分为6个日粮处理组，每个处理组5个重复，每个重复组8只 鸡，试验期42天。以玉米和豆粕为主要原料配制试验基础日粮，对照组饲喂基础日 000和2000 粮，其他5种试验日粮分别是在基础日粮中添加50、200、500、l mg／kg 的壳聚糖配制而成。试验1研究了壳聚糖对肉鸡体液免疫功能和细胞免疫功能的影 响，进一步验证了壳聚糖对肉鸡免疫功能的促进作用。试验2主要从内分泌角度探 讨了壳聚糖对肉鸡免疫功能的影响机制。试验3主要通过研究壳聚糖对肉鸡小肠组 织中iNOSmRNA和cPLA2mRNA相对表达的影响，探讨了壳聚糖对肉鸡免疫功能 影响的分子机理。试验4利用体外细胞培养法，研究了不同浓度壳聚糖(O，40，80，160 和320 I-tg／m0对肉鸡腹腔巨噬细胞分泌功能及iNOS 达的影响，从细胞水平和分子水平进一步探讨了壳聚糖对肉鸡免疫功能的影响机制。 在本研究的试验条件下初步得出以下结果： ①日粮中添加壳聚糖可提高肉鸡的体液免疫功能与细胞免疫功能。壳聚糖添加 量为500～1000 mg／kg时，新城疫抗体滴度、T淋巴细胞亚群含量、血清免疫球 蛋白浓度均呈不同程度增加，肉鸡免疫功能较强；壳聚糖添加量为2000 mg／kg时， 肉鸡免疫功能呈降低趋势。 ②日粮壳聚糖对肉鸡血清免疫细胞因子IL．1、IL．2和相关激素的影响呈显著二 次曲线剂量依赖关系(尸0．05)。壳聚糖的添加水平为500～1000mg／kg时，血清 高到2000 程度的降低趋势。提示壳聚糖对肉鸡免疫功能的影响与免疫细胞因子和相关激素的 水平发生改变有关。 ③利用体内法从分子水平研究了日粮壳聚糖对肉鸡免疫功能的影响机制。研究 mRNA表达， 表明：日粮壳聚糖可提高血清NO含量及iNOS活性，增强小肠iNOS 血清NO含量、iNOS活性与小肠iNOSmRNA表达均随壳聚糖添加量的增加而增 000 加，并呈显著的二次剂量依赖关系(尸0．05)；其中，以添加500～1 mg／kg时 较高，添加2000 mg／kg时则有降低趋势。日粮中添加壳聚糖对肉鸡血清PLA2、AA mRNA表达均有显著的促进效果。随壳聚糖添加 和PGE2浓度的增加及小肠cPLA2 量的增加，上述各项指标均呈显著的二次曲线增加妒O．05)：其中以添加500～1 000 rng／kg时效果较好，但添加2000mg／kg时促进效果呈降低趋势。 ④体外法研究结果表明：壳聚糖可显著增强肉鸡腹腔巨噬细胞iNOSmRNA表 噬细胞cPLA2 分泌均有一定促进效果。提示壳聚糖可促进肉鸡巨噬细胞的分泌功能。 ⑤以上结果提示，壳聚糖影响肉鸡免疫功能的分子机制可能是：壳聚糖通过诱 调节肉鸡的免疫功能；壳聚糖通过调控肉鸡cPLA2InRNA表达与cPLA2活性，促进 cPLA2分解膜磷脂产生AA，进而调节肉鸡的免疫功能。 ⑥综合多项试验结果初步得出，壳聚糖刺激肉鸡免疫功能的日粮适宜添加量为 ‘ 500～1000 mg／kg。 关键词：壳聚糖；肉鸡：免疫；iNOS；cPLA2；基因表达 EffectsofChitosanonImmuneFunctionsinBroiler and