园艺植物组织培养-摘要.pptVIP

Huo XW, IMAU 第二章 实验设备及培养条件 培养条件 第一节 实验室 一个标准的组织培养实验室应当包括：洗涤室、配置室、无菌室、培养室、观察室等。在实际中可结合可行条件，合并一部分。 一、洗涤室 clean-up room 二、准备室 media preparation room 三、接种室 transfer room, sterilized room or a chamber for transferring cultures 四、培养室 culture growing room 一、洗涤室 clean-up room 二、准备室 media preparation room 准备室还应配备以下仪器设备： 1 工作台 2 药品柜 3 普通冰箱 4 电子分析天平和托盘天平 电子分析天平 5 电蒸馏水器 6 磁力搅拌器 7 恒温水浴锅 8 电炉或电饭锅 9 酸度计 10 培养基分装设备 11 高压灭菌锅 12 恒温培养箱 13 烘箱 三、接种室 transfer room，sterilized room 接种室宜小不宜大，一般7-8m2，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。 接种室要求干爽安静，清洁明亮。 在适当位置吊装1-2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。 接种室应设有缓冲间，面积2平方米为宜。 接种室的主要设备及用具有： 1 接种箱 2 超净台Sterilized facility 3 解剖镜 4 无菌操作用的器具 按单人超净台上用量有：酒精灯1个；20-25cm长的医用镊子1把；解剖刀；医用剪；广口瓶，内放酒精，用于浸泡镊子、刀、剪等；用于架放灼烧过的刀、镊子的小架。 四、培养室 culture growing room 培养架:培养架大多由金属制成，一般设5层，最低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架即高1.7m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计，如采用40W日光灯，则长1.3m，30W的长lm，宽度一般为60cm。 培养室最重要的因子是温度，一般保持在20-27℃左右. 室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在70％-80％为好。 控制日光照时间可安装定时开关钟，一般需要每天光照10-16h也有的需要连续照明。短日照植物需要短日照条件，长日照 植物需要长日照条件。 第二节 培养条件 在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、pH值、渗透压等各种化学环境条件都会影响组织培养育苗的生长和发育。 一、温度 temperature 不同植物繁殖的最适温度不同，大多数在20--30℃，通常控制在（25+2）℃恒温条件下培养。 温度过低（≤15℃）或过高（ 35℃）都会抑制细胞、组织的增殖和分化，不利于培养物生长。 一些例外情况。利用细胞培养、低温保存植物资源时，可在-196℃条件下限制其生长，延长存储时间。 不同植物培养的适温不同。百合的最适温度是20℃、月季是25-27℃，番茄是28℃。 温度影响植物组织培养育苗的生长速度，分化增殖、器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。 不同培养目标采用的培养温度也不同。 百合鳞片在30-C以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率都比在25 ℃以下的高。桃胚在2-5℃条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35℃处理草莓的茎尖分生组织3-5d，可得到无病毒苗。 低温预处理利于培养。 在烟草花药培养中，在5℃下预处理48h后进行培养，能促进体细胞的形成。 在确定某种培养物的适宜温度时，要考虑原植物的生态环境才能获得最佳效应。例如，生长在高海拔和较低温度环境下的松树，若在较高温度下培养，试管苗生长十分缓慢。 二、光照 1ight 1．光照强度 1ight intensity 光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。 一般培养室要求光照12—16h/d，光照度1000-5000lx。 不同的培养物对光照有不同的要求。一些植物（如荷兰芹）的组织培养中，其器官形成不需要光；而另一些植物，如黑穗醋栗，光条件下可显著提高其幼苗的增殖。 同一种植物对光照的要求也不同。 百合原球茎在暗培养下长出小球茎，在光照条件下长出叶片。对短日照敏感的葡萄品种，其茎段的组织培养只有在短日照条件下才能形成根；对日照强度不敏感的品种则在任何光周期下都能生根。 2. 光质 light wave 光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。 不同的光波对器官分化关系密切。例如，在杨