丽蝇蛹集金小蜂巢发育与卵黄发生的时间动态.pdfVIP

中文摘要 昆虫卵黄发生及其内分泌调控一直是昆虫生殖生理的研究核心之一，至今已就10个目 60余种昆虫不同程度开展地了这方面的研究。但是，就膜翅目昆虫而言研究较少，关于膜 翅目的寄生蜂则更少，且对寄生蜂是否拥有卵黄蛋白存有争议。迄今为止，就外寄生蜂是否 拥有卵黄蛋白尚乏任何研究。为此，本论文就蝇类蛹期外寄生蜂一丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitr／penn／s 膜翅目：金小蜂科 ，卵巢发育、卵子发生，卵黄蛋白的分子特性，及卵黄原蛋白 的合成、卵巢对卵黄原蛋白的摄取及卵子内卵黄磷蛋白的降解动态作了研究，结果如下： 丽蝇蛹集金小蜂卵巢83％哇1 4对卵巢管组成，17％由3对卵巢管组成。同一根卵巢管中 的卵子可分为三级，即l级卵 无卵黄 、2级卵 含有部分卵黄 和3级卵 充满卵黄 。 卵巢管从寄生后第10天开始出现 此时，卵巢管是透明的，卵室尚未形成 ，l级卵从寄生 后第11天开始出现，2级卵从寄生后第12天开始出现，3级卵从羽化后第一天开始出现： 喂20％蜂蜜水对卵巢发育有一定促进作用，能显著延长丽蝇蛹集金小蜂的寿命，不喂食或 仅喂蒸馏水，其寿命仅4天，而喂食20％蜂蜜水，从第】1天开始出现死亡，大部分可存活 15天，另有少部分生存达一个月之久。同一种喂食处理中，卵巢长度的时间动态几乎都无 变化；1级卵子数、2级卵子数和成熟卵子数的变化，是抛物线变化趋势，即先增加，然后 减少：基部卵子短径和长径也是抛物线变化趋势。 PAGE电泳结果表明：丽蝇蛹集金小蜂明显存在2条雌特异性带．卵黄蛋白，分子量分 别为18lKD和136 KD、 KD；SDS—PAGE电泳分析：存在3条雌特异性带，其分子量为123 120 KD和91 由2个蛋白组成，其中分子量较大的蛋白由2个亚基组成；双向电泳结果显示，在120KD 附近有两个特异性点，其等电点为5．5和5．7；双扩散表明，丽蝇蛹集金小蜂卵黄磷蛋白的 抗血清与雌隐成虫虫体、脂肪体、血淋巴和卵巢匀浆液均有免疫沉淀反应，而与雄蜂血淋巴 无免疫反应。说明了Vg与vn具有免疫同源性，是雌特异性蛋白，且由脂肪体合成。 采用ELISA测定法检测了丽蝇蛹集金小蜂卵黄原蛋白合成与摄取，及卵黄磷蛋白降解 d， 的时间动态。结果表明，该蜂卵黄原蛋白的合成与摄取分别起始于寄生后的第10d和第13 即正处于该蜂的蛹初期和隐成虫期。该蜂卵内的卵黄磷蛋白随其胚胎发育过程而降解，寄生 后第3d，即胚胎发育结束时则全部降解完毕。此外，尚探讨了卵黄蛋白合成、摄取和降解 过程中．血淋巴、卵巢或卵内可溶性蛋白含量的时间动态变化。 关键词：丽蝇蛹集金小蜂．卵巢发育，卵子发生，卵黄原蛋白，卵黄磷蛋白，可溶性总 蛋白，双向电泳，PAG黾SDS，分光光度计，免疫双扩散 前 言 蝇类是粪食性、腐食性昆虫，其中大多数是重要的卫生害虫。它们污染食 物、传播疾病、骚扰人畜、威胁人畜健康。 害虫综合治理可以说是经纬万端，而权衡利弊，则往往见仁见智。化学防 治虽可以收到立竿见影之效，但在歼灭害虫的同时，不可避免的摧残天敌昆虫， 导致害虫的再增猖獗；污染环境，破坏生态平衡，甚至危及人畜健康。随着人们 生活水平的提高，特别是环保意识的加强，现在“三生共礅”，即“生产增长、生 活提高、生态改善”成了人们普遍的共识。对环境安全问题的日益重视，寻求化 学防治之外的卫生害虫防治途径，以尽量减少化学杀虫剂用量、生产无公害、绿 色食品，已成必然趋势。其中，通过生物防治措施来有效控制卫生害虫，已成为 人们努力的目标。如作为用于生防的重要生物类群寄生蜂，在卫生害虫的控制中 已发挥了应有的作用。如1914年，澳大利亚引进丽蝇蛹集金小蜂防治丽蝇 blow ny ；1922年，新西兰从新威尔士引进丽蝇蛹集金小蜂防治牧场的羊蛆 sheep maggot 夏松云，1997 。从基础性研究而言，限制寄生蜂控制潜能发挥的～个 重要原因是，人们对其的生殖生理规律缺乏系统的研究，认识尚不深入。 昆虫卵黄发生及内分泌调控一直是昆虫生殖生理领域的核心问题，至今已 在多种昆虫中开展了研究 叶恭银等，2000 ，但其中所涉及的寄生蜂，仅有日 本瘤姬蜂Pimplanipponica Nose 孙萌，2000；吕慧平，2002 等少数几种。研究昆虫卵黄发生的规律，可为更 有效地保护、繁殖和利用寄生蜂提供理论依据，从而更好地发挥其在害虫生物防 治中的作用。 鉴于此，作者以丽蝇蛹集金小蜂为研究对象，研究了其卵子发生、卵巢发育、 卵黄的合成、摄取及降解的规律，旨在为充分发挥该蜂的生殖潜能、提高人工繁 蜂效率及有效保护利用等提供理论指导和技术支撑，从而更好地发挥其在蝇类生 物防治中的作用。 致谢 论文是在叶恭银教授指导下完成的。从课题论证到实验全过程，从