o型口蹄疫病毒p1基因在昆虫细胞杆状病毒中的表达.pdf

摘要 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种严重危害猪、牛、羊等多种偶蹄动物的急性、烈性传染病。 该病发病率高，传染性强，对畜牧业生产、肉食品供应、家畜及其产品的国际贸易造成重大影响， 历米受到各国政府的高度重视，世界动物甲生组织将其列为动物A类疫病之旨，我国将其列为一 类动物疫病。 我国周边国家口蹄疫疫情非常严重，白上世纪90年代，O型口蹄疫病毒“泛亚”毒群在亚洲 地区的泛滥，对我国口蹄疫的防控措施提出了严峻的挑战。目前，我国主要采取免疫接种O型口 蹄疫灭活疫苗为主的综台防控措施，因此，疫苗的免疫效果成为预防此病的关键。 口蹄疫病毒的VPI蛋白是诱导中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。因此，利片j 基因工程技术体外表达重组vPl蛋白可用丁口蹄瘦病毒免疫抗体水平的检测。目前，国内外许多 研究学者已在火肠杆菌中成功地表达了口蹄疫病毒的VPl基冈，尽管表达效率较高，但由于重组 蛋白的纯化比较困难，且残留的大肠杆菌抗原成分会与动物体内的大肠杆菌抗体发生非特异性反 应，因此很难在实际中得到应用。 本研究成功地在sf9昆虫细胞中表达了。型口蹄疫病毒VPl蛋白，利用VPl蛋向单克隆抗体在 细胞水平上检测重组VPl蛋向，结果表明重组vPl蛋白特异性地在胞浆内表达。利用ELISA方法 对重组蛋白进行活性鉴定，结果表明重组VPl蛋白具有较好的反应活性，且表达的重组蛋白与血 清中存在的其他抗体成分不存在交义反应，因此将其用于口蹄疫免疫抗体水平检测具有良好的应 用前景。 关键词：o型口蹄疫病毒；结构蛋白VPl；杆状病毒：抗体监测 Abstract Footandmouth isa diseasecausedfootandmouthdisease disease(FMCnhighlycontagious by sent as and threattocloven—hoofedanimalssuch virus(FMDV)whichgreat swine，bovine sheep．The outbreakitcausedcouldleadtoanenolTuouslossoflivestock and aswellas epidemic productionsupply the internationallivestock ofcountriesalloverworldhave muchattention trading．Thegovernment paid to andcontrolthis disease．OfficeInternationaldes our prevent contagious Epizooties(OIE)and rankitinthefirstin animals． all diseasesfordomestic government contagious ThesituationofFMD was seriousin countries to very circumjacentChina，the prevalence many