大片吸虫cdn文库的构建及组织蛋白酶l1基因的克隆和表达.pdf

摘要 腑彻触)寄生于牛、羊等多种动物的胆管和肝脏中引起的一种寄生虫病。该病在我国分布 广泛，给畜牧业带来巨大的经济损失。同时片形吸虫的囊蚴也可感染人，严重危害人们的健 康，是一种重要的人兽共患寄生虫病。 本研究利用SMARTcDNA文库构建试剂盒成功构建了大片吸虫成虫cDNA文库，文库 库容量为2．08×106 平均大小约为1000 g而弘nffc口Cathepsin GSTResill亲和层析法进行 导以包涵体形式表达，其分子量为61KD左右，利用Hi曲．Affinity 吸虫的牛血清。 用纯化的FgCLl作为包被抗原，建立了一种检测片形吸虫病的EUSA诊断方法，并对 EuSA反应条件进行了优化。确定抗原的最适包被浓度为4u咖ll：血清的稀释度为1：200， 阴阳性临界值为0．143。重组抗原与血吸虫、华支睾吸虫、弓形虫无交叉性感染，但与东毕 吸虫有轻微交叉反应，说明建立的EuSA方法特异性较好。为我国片形吸虫病的免疫诊断和 血清学调查提供了行之有效的技术手段。 关键词：大片吸虫cDNA文库，组织蛋白酶L1，EuSA