旋毛虫分子分类49ku结构基因在昆虫细胞中表达研究.pdfVIP

摘要 18S 生物体内含量较大占80％左右，且在进化过程中非常保守，核苷酸的替换率较低，因而 它是揉讨生物高级分类群系统演化的难得工具之一。本实验克隆并比较了旋毛虫5个隔 离种的18srRNA基因序列，分析他们的同源性，为旋毛虫的分类和诊断开辟了新的途 径。旋毛虫排泄分泌(Excretory-Secretory 合Trizol RT-PCR扩增目的基因18S 送有关生物公司测序，同时在哈尔滨兽医研究所生物技术重点实验室也进行测序。用 DNAstar和Genedoc软件分析结果显示，18S rRNA基因的种间同源性很高，均在99％ 以上。猪旋毛虫与旋毛形线虫的同源性为99．4％，犬旋毛虫与本地毛形线虫的同源性为 99．3％，猫旋毛虫与旋毛形线虫比与本地毛形线虫的同源性要略高O．4％。因此，猪旋毛 虫与旋毛形线虫，犬旋毛虫与本地毛形线虫的亲缘关系更近，这与传统分类学的结果相 符台。本地毛形线虫和猪旋毛虫的18S 扩增本地毛形线虫49ku ES结构基因，酶切后与供体质粒连接，在大肠杆菌中克隆，将 克隆有外源基因的供体质粒转化DHl0Bac感受态细胞，该细胞含有杆状病