氟对体外培养绵成骨细胞bcl-2和bax基因表达的影响.pdf

摘要 为探讨氟化物在氟中毒所致骨相损害中的毒性作用。本研究以2～3月龄胎绵羊颅盖骨为材 料，采用酶完全消化法分离成骨细胞，通过形态观察(Giemsa染色)和钙化结节(茜素红法)染色鉴 白斑筛选，质粒酶切鉴定后。将阳性菌液送交测序公司测序以再次进行验证；利用实时荧光定量 PCR检测不同浓度NaF对体外培养成骨细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响．结果表明： l、成功扩增出bcl-2和bax基因的部分序列；引物特异性高，可进行后续的荧光定量PCR工 作． 2，1．0x10一Smol／L NaF组Bcl一2基因表达水平较对照组高，其他组BcI．2表达水平均比对照组 组外，Bci-2／Bax比值均比对照组低。且5．0x10一‘‘mol／L组最低。 NaF能增加成骨细胞线粒体膜的通透性，下调bcl-2mRNA表达，上调baxmRNA表达，启动 了线粒体凋亡信号转导途径． 关键词：氟化钠，成骨细胞，bcl-2，bax，克隆，测序，荧光定量PCR Abstraet The istoevaluatethe offluorideinskeletal s