溶藻弧菌(virio alginolyticus)sr1热修饰性外膜蛋白30kda的筛选鉴定及其对牙鲆的免疫保护力研究.pdfVIP

溶藻弧菌(m砌口蜘D劬妇跖s)SRl热修饰性外膜蛋白 30kDa的筛选鉴定及其对牙鲆的免疫保护力研究 摘 要 溶藻弧菌(班6，．f0口弛nD纱以c螂)是海水养殖动物如鱼、虾、贝类等的致病菌 可引起多种海水养殖动物及人类发病，研制相关疫苗，开展免疫防治是预防该类 疾病的重要手段。目前研究表明，热修饰性蛋白(Heat-modifiableprotein)是一 类保守性较高，免疫原性良好的细菌外膜蛋白，是一种潜在的细菌病疫苗候选材 料，所以本研究以此为切入点，对溶藻弧菌热修饰性蛋白进行筛选鉴定。根据热 修饰性蛋白在不同温度下具有不同电泳迁移性的特性，本论文对提纯的一株大菱 鲆致病性溶藻弧菌sRl的外膜蛋白进行热处理，并结合电泳及免疫学手段，筛 选、鉴定出了溶藻弧菌外膜蛋白中的一个分子量为30kDa的具热修饰特征的蛋 白，比较分析其抗原保守性及在各溶藻弧菌内的分布情况，进而以双向电泳结合 质谱鉴定技术对30如a的蛋白种类进行了鉴定，并对牙鲆进行免疫与攻毒，验 kDa的免疫保护力。具体方法结果如下： 证了热修饰性外膜蛋白30 (1)用十二烷基肌氨酸钠(S列(osyl)抽提并结合超速离心的方法提取了一株 大菱鲆致病性溶藻弧菌