红笛鲷非特异性胞毒性细胞活性及其受体表达的研究.pdfVIP

红笛鲷非特异性细胞毒性细胞活性及其受体表达的研究 摘要 本论文以我国南方主要海水养殖鱼类之一——红笛鲷(Lutjanussanguineus)为 研究对象，制备了兔抗红笛鲷非特异性细胞毒性细胞(NCC)受体NCCI冲．1融合蛋 白的抗血清，初步建立了NCC的有效分离手段，探讨了NCC的活性以及抗血清对 的基因表达。 将表达的NCCRP．1融合蛋白进行纯化并利用纯化后的融合蛋白按常规方法免疫 新西兰纯种大白兔，制各了兔抗红笛鲷NCCRP．1融合蛋白的抗血清，ELISA测定其 效价为1：32000。利用该抗血清进行免疫组织化学分析，发现NCCRP．1只在头肾、 脾脏和胸腺的特定细胞中表达。 为深入研究NCCRP．1抗血清对红笛鲷NCC活性的抑制作用，首先分离红笛鲷 头肾中的NCC，选用NCC特异性的作用对象之一——人类细胞系K562为靶细胞， 通过流式细胞仪检测了NCC杀伤K562的活性；并在效应细胞和靶细胞中加入一定 量的兔抗红笛鲷NCCRP．1融合蛋白抗血清，分析了抗血清对NCC活性的抑制作用。 效果最佳，流式细胞仪检测NCC占整个白细胞的比例约为(44．8+0．8)％。当效应细胞 NCC和靶细胞K562以一定的比例混合后，流式细胞仪检测发现NCC具有很强的