牦牛周期黄体退过程中黄体细胞凋亡的生物学特征.pdfVIP

牦牛周期黄体退化过程中黄体细胞凋亡的生物学特征 摘 要 本研究采用不同的手段和研究方法，通过对牦牛周期黄体退化过程中组织形 态学的观察、体外培养条件下周期黄体细胞凋亡的生物学特征的分析、TNFa对 体外培养周期黄体细胞凋亡的影响以及周期黄体退化过程中黄体细胞内c—myc 和Bad的表达的测定等，系统地研究了牦牛周期黄体退化过过程中细胞凋亡的 生物学特征，取得了如下结果： (1)采集不同阶段牦牛的周期黄体，进行HE染色、光镜观察、超微结构 观察和DNA原位荧光标记检测(DAPI)，发现整个周期黄体期均有黄体细胞凋 亡现象，但主要见于发情期黄体。随着黄体老化，黄体组织中的血管也发生退化。 (2)用酶消化法制备牦牛原代黄体细胞，经血清撤除诱导其凋亡，然后检测其 生物学特征。采用原位荧光标记(DAPI和PI法)法检测发现，凋亡细胞主要表 现为核固缩、并发散高亮的蓝色荧光；DNA原位末端标记检测表明，凋亡细胞 呈TUNEL阳性反应；透射电镜观察显示，凋亡细胞核固缩、染色质边集、核碎 裂和凋亡小体形成；DNA电泳呈现典型的“梯状带”，与已知分子量的Mark 对比，证实凋亡的黄体细胞中存在分子量为180--200bp整倍数的DNA片段。 (3)在培养液中，添加不同