mir-21在多糖诱导的肺泡巨噬细胞中的动态表达及其与tnf-α的相关性分析.pdf

摘要 摘要 目的： 肿瘤坏死因子．a(TNF．0【)的动态表达情况，分析它们的表达变化相关性，探讨 miR．21在肺泡巨噬细胞炎性反应中的作用。 方法： 按1×106个／mL把体外培养的肺泡巨噬细胞接种于六孔板，90min贴壁后加 入终浓度lg∥mL的脂多糖，在刺激之后的Oh、3h、6h、12h时间点离心后分 Blot检测细胞核中NF．r．B 别收集培养上清液与细胞团块。Westem p65蛋白表 达情况，酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中TNF．0【蛋白表达水平。双变 量相关性分析法分析miR．21和TNF．0【mRNA的相关性。 结果： p∥mL)，12h到达表达高峰(769．92士57．73pNmL，P0．01)； (2)脂多糖刺激NR8383肺泡巨噬细胞后，细胞中的miR一21表达水平逐 渐增高；3h与Oh 和12h(6．28士0．95倍P0．01)miR-21的表达量逐渐升高。 12h时间点细胞核中NF．rd3 p65蛋白较0h组均表达上调。 呈负相关(r=．0．895，P0．01)。 结论： mRNA表达逐渐下调，即细胞中miR．21的表达水平与TNF．amRNA的表达水 摘要 平呈负相关，推测miR-21可能负性调控了NR8383肺泡巨噬细胞的炎症反应。 坏死因子．(it Abstract ABSTRACT objective： Toobservethe ofmiR-21 andtumornecrosisfactor dynamicexpression alpha reactioninalveolar induced duringinflammatory macrophagesbylipopolysac- oftheir over the time，and charide，analysispossiblerelationship investigatepossible 1 reactioninit． roleofmiR-2 duringinflammatory Methods： x in well invitroat2106 NR8383alveolar wereseeded6 macrophages plates LPSat final cells／mL，90minlateradherentcellswerestimulated谢m 1斗g／mE were after at andcells collected Oh，3h，6h， concentration，supematant centrifugation 12htime