鲶鱼骨蛋白酶解物中抗菌活性物质初步分离纯化.pdfVIP

食品与发酵工业 FOOD AND F ERM EN TA TION INDU STR IES 鲶鱼骨蛋白酶解物中抗菌活性物质的初步分离纯化 1 2 2 张建荣 ,马俪珍 ,梁鹏 1 ( 山西农业大学食品学院 , 山西 太谷 ,03080 1) 2 (天津农学院食品科学系 ,天津 ,300384) 摘 　要 　用胃蛋白酶酶解鲶鱼头 、鱼骨 ,酶解得到抑菌活性较高的鲶鱼骨酶解液 ,然后对酶解液进行初步分离与 ( ) 纯化 。鲶鱼骨蛋白抑菌活性最强的酶解物经过超滤 MW 3 000 u 和 Sep hadex G15 凝胶层析分离纯化 ,采用比 浊法和滤纸片法测定其抑菌活性 。结果表明 ,分离纯化后 ,酶解混合物对大肠杆菌 、藤黄微球菌以及枯草杆菌的 抑菌活性都有一定的提高 ,其中层析后峰 2 的抑菌活性最强 ,峰 2 对大肠杆菌 、藤黄微球菌以及枯草杆菌的抑菌 活性要比酶解粗品提高 1 倍左右 ,且各组分的平均分子质量均在 1 500 u 以下 。峰 2 经反相高效液相色谱分析 得出 ,组分由70 多种物质组成 ,要想得到纯的抗菌活性物质还需要进一步深入研究 。 关键词 　鲶鱼骨 ,酶解 ,抑菌活性肽 ,分离纯化 　　目前对肽类物质分离纯化的方法有许多种 ,常用 G25 和聚丙烯酰胺凝胶 电泳分离等 ,从林蛙皮肤中 的分离方法有 :超滤法 、凝胶过滤层析 、凝胶电泳 、离 分离获得 5 种小分子多肽 。Wang [9 ] 对小麦蛋白进行 子交换树脂 、反相高效液相色谱 、快速蛋白质液相色 酶解 ,并对酶解物进行超滤 ,发现超滤后酶解物的功 谱等[ 1] 。J eonn [2 ] 等应用超滤技术对鳕鱼蛋 白水解 能特性显著提高 ,他认为酶解物的功能特性与分子质 物进行分离纯化 , 获得 3 个部分的肽片段 , 10 ～30 量的大小有紧密的关系 。 ku 的肽片段具有优 良的乳化特性和搅打性能 ,分子 本试验拟采取超滤法和凝胶过滤层析法对鲶鱼 质量量介于 3～10 ku 的肽片段 ,其抗氧化性能很高 , 骨蛋白酶解液进行初步分离纯化 ,然后用反相高效液 而分子量小于 3 ku 的肽片段 ,具有显著的抑制 A CE 相色谱对分离组分进行纯度的研究 。对所得纯化产 的活性 ;J iunRongchen[ 3 ] 等用 胃蛋 白酶酶解大豆分 物的抑菌性进行测定 ,并将酶解物粗品、超滤后组分 离蛋白,采用凝胶色谱柱和离子交换分离得到的分子 以及层析后组分进行抑菌活性的比较 。 质量在 300～5 000 u 的小分子肽具有很好的生理免 疫功能 。Kim[4 ] 等利用三步超滤和反相高效液相色 1 　材料与方法 谱法从明胶的水解物中分离出2 条具有抑制 A CE 活 1 1 　试验原料 性的三肽 ;J ang[ 5 ] 等人用超滤 、凝胶过滤色谱和反相 ( 革胡子鲶鱼头及骨 购 自天津市王顶堤水产批发 高效液相色谱联合的方法从牛肉蛋白水解物中分离 )