南洞庭湖野生经蚌类遗传聚类分析及rapd特异标记的筛选.pdf

中文摘要 近年来，湖泊、河流等内陆水域污染程度加剧、蚌类栖息地的人为干预和资源的过度 开发利用，这在一定程度上对淡水蚌类的种质资源造成破坏，一些经济蚌类的自然资源日 益减少甚至濒临灭绝，尤其是育珠蚌种质资源退化严重，严重制约了淡水育珠产业的发展。 因此，为了进一步了解不同种类的野生经济蚌的遗传多样性现状，从分子遗传学角度对洞 庭湖区野生经济蚌类资源进行评估，本研究采用RAPD技术对南洞庭湖9属15种共61个 野生经济蚌类的遗传聚类关系进行了分析，找出了种属问特异RAPD标记引物和特异标记 条带，并对蚌的不同组织基因组DNA提取效果进行了比较。具体实验结果如下： 1．采用改良C圆法提取蚌的性腺、斧足、外套膜、闭壳肌、鳃、肝脏六个主要组 织器官的基因组DNA，发现性腺的提取效果最好，提取过程中研磨容易，水浴消化时间短， DNA电泳带型最清晰；斧足的提取效果次之，只是在提取过程中，斧足研磨难度比较大， 水浴消化时间较长；提取效果最不理想的是外套膜，DNA带型不明亮，且有拖尾现象。总 的来讲，采用改良CTAB法能够提取淡水蚌类不同组织的基因组DNA，且所提取的DNA 能够满足实验ALFP和RAPD的实验要求。 2．经重复筛选，从60条RAPD随机引物中筛选出1l条能够扩增出清晰、稳定且重 复性好的RAPD指纹条带的有效引