2-2菌种生产-培养基配制.ppt

准备工作 2、原种、栽培种培养基 （三）培养基的灭菌 粉状 条状 属天然植物多糖?融点96℃以上凝点40 ℃以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用 特性 返回本节 马铃薯去皮、挖掉芽眼、切片 称量 熬煮（酥而不烂） 双层沙布过滤取滤汁，加糖 滤汁加入糖，熬琼脂、定容 分 装 塞棉塞 扎捆、灭菌 返回本节 斜面 平板 返回本节 白糖1，石灰1，过磷酸钙1 辅料 棉籽壳87，麦麸10 主料 配方（%） 棉壳、麦麸干混余料溶于水后浇入主料清水翻拌至含水量 配制 (1)棉籽壳培养基 返回本节 石膏粉1%,碳酸钙0.5% 辅料 麦粒、玉米粒等98.5% 主料 调pH与分装 pH：一般为8.0左右原种培养基装大口瓶栽培种培养基装菌种袋 配方（%） 颗粒洗净，1%石灰水泡胀文火煮沸15~20min晾至无明水后拌入余料 配制 (2)颗粒培养基 返回本节 返回本节 栽培种的装袋 返回本节 1、母种培养基的灭菌  无菌检验约30℃条件下→空白培养2~3天 灭菌与摆斜面 摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃） 20~30min 返回本节 * * * * * * * * * * * 菌种培养基 菌种概述 菌种培养基 返回本章 一、菌种概述 菌种 担孢子或子囊孢子 野生 扩大繁殖后的纯次生菌丝体 栽培 来历 野生菌驯化原菌株改良生物技术创新 优良菌株 扩大繁殖 用于生产 实行纯培养不含任何杂菌 基本要求 返回本节 （一）概念 （二）菌种类型 母种 原种栽培种 级别 按 保藏用种 实验用种生产用种 目的 状态：固体菌种、液体菌种 返回本节 级别不同的菌种 1.一级种（母种） 用分离法首次得到的纯次生菌丝体 概念 概况 培养环境 试管、斜面培养基 用途 再生母种 扩大原种保藏用种 菌丝弱而少、不可直接栽培 特点 返回本节 返回本节 2.二级种（原种） 将母种扩大至粗放培养基上形成的菌种 概念 概况 培养环境 菌丝较多而壮、适应性较强 特点 用途 扩大栽培种 大口瓶、较粗放的液体或固体培养基 返回本节 返回本节 3.三级种（栽培种） 将原种扩大至粗放培养基上形成的菌种 概念 概况 培养环境 菌丝多而壮、适应性强 特点 用途 栽培生产 菌种袋、较粗放的液体或固体培养基 返回本节 返回本节 生产总过程 母种 栽培种 栽培 原种 子实体 返回本节 返回本节 状态不同的菌种  用固体基质培养的菌种 1.固体 菌种 概念 特点 设备、工艺简单菌龄长而不一发酵率较低 用液体基质培养的菌种 2.液体 菌种 概念 特点 设备、工艺较复杂菌龄短而一致发酵率高易老化和自溶 返回本节 生 长 势 的 区 别 液体菌种 固体菌种 返回本节 返回本节 （三）菌种生产程序 四大步骤 制培养基 灭菌 培养 接种 返回本节 菌种培养基 （一）概述 1、概念及要求 2、培养基的类型 （二）各级菌种的培养基 1、母种培养基 2、原种、栽培种培养基 （三）培养基的灭菌 返回本章 （一）培养基的概述 1、概念及要求 概念 人工配制的适于菌种生长的营养基质 要求 营养种类、比例、水分、pH适宜； 保持无菌状态。 返回本节 类型 天然：天然有机物合成：已知成分的化学药品半合成：？ 原料来源 状态 液体：营养液 固体 固体：天然固体原料固化：加1.5%~2%琼脂 表面形状 斜面培养基 平板培养基 2、培养基的类型 返回本节 （二）各级菌种的培养基 1、母种培养基 （1）通用配方 （2）配制过程 PDA 马铃薯200g、葡萄糖20g琼脂15~20g、水1000m1 返回本节 煮沸20min，取定量滤液 制马铃薯滤液 滤液沸时加入，融后加余料 融化琼脂 调解pH 勿污管口，控制装量 分装试管 准备灭菌 扎捆 10%NaOH或HCL 返回本节 * * * * * * * *