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Y 738997 建立以GFP为报告基因检测HSV感染的细胞株 摘 要 fluorescent 目的建立以加强型绿色荧光蛋白(enhanced green protein，EGFP) 为报告基因检测人单纯疱疹病毒(herpesvirus，HSV)感染的细胞株。 simplex 方法提取HSV-2DNA，利用DNAStar软件设计对应于Hsv_2(Sal5株)ICPl0 收纯化的PCR产物连接至pMDl8一T载体构建亚克隆，切下目的基因，连接至真核 以倒置荧光显微镜检测GFP荧光。 结果经PCR扩增获得641bp大小的目的基因片段，构建的重组质粒 转染Vero细胞后，以G418筛选1l天出现阳性细胞克隆，建立的稳定转染细胞株 到GFP绿色荧光，随着时间的增加，GFP荧光的量及强度逐渐增加。 快速、灵敏等优点，特异性较高，进一步完善后有望用于HsV-2感染的快速诊断及 抗病毒药物的