德国镜鲤基因组na文库的构建及igf-ⅱ基因的筛选与鉴定.pdfVIP

德国镜鲤基因组DNA文库的构建及 IGF—II基因的筛选与鉴定 摘要 德国镜鲤(CyprinuscarpioL．mirror)原产于德国巴伐利亚州， 要对象，以后又移植到以色列、日本及我国等亚洲国家。尽管镜鲤是 我国水产主要养殖品种，其分子生物学研究却远远滞后。胰岛素样生 长因子一il(IGF—II)是IGFs基因家族中的一员，它在促进生长， 胚胎发育，脑部发育，肿瘤形成等方面都有重要作用。建立一个完整 的基因组DNA文库是开展分子生物学研究的一个基础工作，是分离特 定基因的有效手段。本论文构建了德国镜鲤基因组DNA文库，并利用 DNA文库对德国镜鲤胰岛素样生长因子一il(IGF—il)基因进行了筛 选与鉴定。 取镜鲤肝组织5克，提取基因组DNA。取少量基因组DNA利用限 制性内切酶Sau3AI进行酶消化预试验，确定得到9--23kb消化产物 u 的最佳酶量和反应时间。利用预试验获得的最佳条件，取100g镜 鲤基因组DNA进行大规模酶消化试验，产物经10％--40％蔗糖密度