冠状病毒hco-229e s1蛋白片段的原核表达及鉴定.pdfVIP

冠状病毒HCoV-229E S1蛋白片段的原核表达及鉴定 中文摘要 病原，常引起人的普通感冒。其基因组RNA是一不分节段的正链单股RNA，长约27 kb，已知编码11种蛋白，其中包括4种结构蛋白，分别是刺突蛋白(S)、包膜蛋 表面，是病毒的主要表面抗原成分，具有受体结合和膜融合活性，在组织嗜性、细 胞融合和毒力等方面起重要作用。S蛋白由S1和S2两个亚基组成，其中Sl形成成 一段内在的融合肽和两段疏水的七次重复区域(HRl和HR2)。这些区域对于病毒的 侵入、细胞与细胞间的融合具有重要意义。本研究将靶蛋白锁定为Sl蛋白片段(S1 417—547位氨基酸)，克隆获得冠状病毒HCoV-229ES1基因片段(S1蛋白1249— 1642位核苷酸)，在原核表达系统大肠杆菌中获得高效表达，对表达蛋白加以纯 化，初步研究其抗原活性。 状病毒HCoV-229E S1蛋白特异性基因片段，并克隆入pET一21a原核表达载体，构建 效诱导表达得到重组蛋白，用金属螯合亲和层析纯化，并通过SDS—PAGE电泳及 Western blot对表达的重组蛋白进行鉴定。 结果：获得了主要以包