ifn-γ介导hmgb1对小鼠系膜细胞的促增殖作用及其可能机制.pdf

中文摘要 IFN．丫介导的HMGBl对小鼠系膜细胞的促增殖作用及 其可能机制 摘 要 目的：本实验以小鼠系膜细胞MMC为研究对象，以IFN一丫为刺激物， 1的促增殖作用；同时通 通过检测小鼠系膜细胞的增殖水平，探讨HMGB 探讨HMGBl促增殖作用及其作用机制。 系统性红斑狼疮(systemiclupus 自发性全身免疫性疾病，其病变侵犯皮肤及多个脏器，约有三分之二的系 统性红斑狼疮患者伴有狼疮性肾炎(LN)的发生，肾脏的损伤程度是判 断其预后的主要指标，同时LN也是其主要的致死原因之一，因此LN的 治疗尤为重要。但是关于LN的发病原因目前研究的并不是非常清楚，专 家认为其发生与免疫系统功能异常、各种细胞因子分泌及表达紊乱有关。 box 1)最初作为 1，HMGB 高迁移率族蛋白1(hi曲mobilitygroupprotein 一种核蛋白被发现，其广泛的参与了细胞的转录，复制等各个环节，可由 单核细胞，巨噬细胞，受损细胞及坏死细胞等释放至胞外，促使炎性细胞 活化并且刺激炎性因子的释放，从而介导并放大炎症反应，发挥其炎性效 应；同时I-IMGBl做为一种免疫佐剂，是危险信号相关模式分子家族中的 一员，可被表达其受体的免疫细胞识别，从而启动机体免疫应答，参与机 体的免疫反应。研究表明，HMGBl在类风湿性关节炎、干燥综合征和系 统性红斑狼疮等免疫性疾病患者的体内均存在不同程度的高表达； HMGBl的促增殖作用也得到越来越多的重视。我们的前期实验检测了 HMGBl在狼疮性肾炎患者外周血及狼疮肾炎的小鼠模型肾组织中的蛋 通过在体外对小鼠系膜细胞的培养研究发现，在IFN吖的介导下， HMGB 节系统，促使小鼠系膜细胞由Go／G1期向S期转化，使细胞进入新的细胞 周期，从而介导了其促增殖作用。但其作用机制尚未得到证实。因此，我 们开展了此次实验，以IFN．丫为刺激物，通过检测小鼠系膜细胞的增殖情 中文摘要 号途径。 方法：选取小鼠系膜细胞MMC为研究对象，同时设立正常对照组及 1099／ml 胞，以BRDU方法检测小鼠系膜细胞的增殖水平。选取小鼠系膜细胞 细胞的增殖情况。选取小鼠系膜细胞MMC为研究对象，同时设立正常对 lh，2h，4h，8h和12h，通过Western 蛋白的表达情况。选取小鼠系膜细胞MMC为研究对象，同时设立正常对 pYr-3．1-shAKT组，以Westem 默效果，通过BRDU方法检测小鼠系膜细胞的增殖情况。 结果： 1 IFN吖上调小鼠系膜细胞增殖水平 IFN．丫刺激小鼠系膜细胞，在刺激初期，小鼠系膜细胞的 以1099／ml 增殖水平开始逐渐上升，至IFN—y作用4h，其增殖水平与正常对照组相 落。 2 以RNA干扰技术将低表达HMGB1及AKT的质粒载体分别转入小 鼠系膜细胞。Western 明显降低。 3HMGB 1低表达的MMC中IFN．Y所介导的促增殖作用减弱 中文摘要 MMC的增殖水平明显下降。 4HMGBl上调小鼠系膜细胞中p-AKT蛋白的表达 Western 的表达没有影响。 5AKT低表达的MMC中HMGB1所介导的促增殖作用减弱 以HMGB 组MMC增殖水平明显升高，而AKT低表达的小鼠系膜细胞的增殖水平 较单纯HMGBl刺激组明显降低(1．302+0．21)。 结论： 1 1表达促进小鼠系膜细胞增殖。 IFN．Y可能通过上调HMGB 2HMGBl能够提高小鼠系膜细胞的增殖，这种作用部分是通过激活 P13K．AKT信号途径实现的。 1；AKT：BRDU；RNAi 关键词：