布鲁菌新型亚单疫苗bp26的动物免疫评价.pdfVIP

中文摘要 目 的： 通过重组布鲁菌BP26 蛋白与铝佐剂和CpG 佐剂联用分别免疫Balb/c 小鼠和 豚鼠，从细胞免疫及体液免疫两方面评价布鲁菌重组 BP26 亚单位疫苗生物学活 性，以及布鲁菌攻击实验评价其免疫保护效果；为新型布鲁菌疫苗的研制提供实 验依据。 方 法： 1、布鲁菌BP26 蛋白的小鼠免疫评价： ①以布鲁菌 BP26 蛋白及分别联合铝佐剂、CpG 佐剂免疫小鼠，分别设立 NS 组，铝佐剂组，CpG 佐剂组，BP26 蛋白+铝佐剂组，BP26 蛋白+ CpG 佐剂组。 分别于 0d，14d 肌肉注射免疫各组小鼠后，检测小鼠机体的细胞免疫反应及体液 免疫反应； ②MTT 法检测小鼠脾淋巴细胞体外增殖； ③流式细胞术检测小鼠外周血淋巴细胞亚类分群； ④ELISpot 方法检测小鼠脾淋巴细胞 IFN-γ 的分泌； ⑤ELISpot 方法检测小鼠脾淋巴细胞 IL-4 的分泌； ⑥ELISA 方法检测小鼠血清总 IgG 抗体水平； ⑦ELISA 方法检测小鼠血清抗体亚类 IgG1 ，IgG2a ； ⑧用牛种布鲁菌 104M 菌株（Brucella abortus ，104M）对免疫后的小鼠进行 攻击