小鼠肾近端小管出球微动脉的三维重建.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………．．1 英文论著摘要………………………………………………………………………5 二、英文缩略语………………………………………………………………………10 三、论文 l 前言…………………………………………………………………………………………………………11日U舀…………………………………………………………………………………………………………l 材料与方法………………………………………………………………………12 实验结果…………………………………………………………………………16 讨论…………………………………………………………………………………………………………26 结论…………………………………………………………………………………………………………29 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………30 1 五、参考文献…………………………………………………………………………3 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………33 在学期间科研成绩………………………………………………………………·4l 致谢…………………………………………………………………………………………………………42 个人简介…………………………………………………………………………”43 ·中文论著摘要· 小鼠肾近端小管与出球微动脉的三维重建 目 的 肾单位是肾结构和功能的基本单位，由肾小体和肾小管组成。近端小管在对 葡萄糖与氨基酸)的重吸收中发挥着重要作用，大约二分之一的超滤液在近端小 管处重吸收。来自皮质不同水平的肾单位近端小管有其各自的走行特点并行使相 应的功能。应用传统方法得到的关于小鼠近端小管的走行及毗邻关系等信息仅仅 局限于曲部与直部的鉴别。很多关于小鼠近端小管的功能研究常常借用大鼠近端 小管的节段性加以讨论。 出球微动脉起自肾小球毛细血管网，在肾皮质终止于肾小管周围毛细血管网， 在髓质终止于直小血管。出球微动脉管径较小，阻力较大，血液流经该段时，血 压降落较大，故肾小管周围毛细血管的血压较低，这一点对肾小管的重吸收十分 重要。作为功能性研究的基础，其形态学特点至关重要。但由于小鼠的个体较小， 出球微动脉管径较细，应用传统方法很难建立其确切的空间走行。 本研究利用计算机辅助三维重建技术，以小鼠肾组织连续切片形成的系列配 准显微图像为基础，重建肾近端小管与出球微动脉的确切空间走行，为肾脏相应 功能的研究与相关肾脏疾病的治疗提供了重要的形态学基础。 实验方法 l、树脂包埋连续切片的制备 肾组织取自三只体重为259的C57／BL／6小鼠。腹主动脉灌流固定(1％戊二 醛和4％羟乙基淀粉，0．06mol／L的二甲胂酸钠缓冲液配制，PH7．4)。垂直于肾长 轴取组织块，锇酸后固定2h，梯度酒精丙酮脱水，树脂812包埋。采用超薄切片 机及钻石刀进行半薄切片，从肾被膜到肾外髓外带，共得到2．5 lan厚的连续切片 1200张，通过甲苯胺蓝染色显示组织微细结构。 2、显微图像获取与配准 AX 70显微镜； 应用“计算机．显微镜．数码相机”图像采集系统(Olympus DP 50相机)，每隔一张切片进行拍照。图像大小为2596×1889像素， Olympus 每个像素相当于1．16岬×1．16