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- 2016-03-09 发布于贵州
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猪mⅱ期卵母细玻璃化冷冻的研究
中文摘要
对卵母细胞进行冷冻保存,能够充分利用卵源,为体外受精、核移植和转基因等胚
胎工程技术的研究和应用提供充足的实验材料。由于猪卵母细胞中含有丰富的脂滴,对
低温非常敏感,对它的研究也可为其它低温敏感性物种的卵母细胞冷冻保存提供参考。
本实验以体外成熟的猪卵母细胞为研究对象,研究了冷冻保护剂对卵母细胞的毒性作用,
并在此基础上研究了冷冻保护剂、细胞松弛素B(CB)处理时间、冷冻载体和脱脂方法
对卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响。
为了评价冷冻液对猪MII期卵母细胞的毒性作用,将卵母细胞分别用15%EG(乙二
理卵母细胞2min和5
的玻璃化冷冻液处理30s,不经冷冻直接脱除冷冻保护剂,然后进行孤雌激活和培养,
对照组卵母细胞在体外培养成熟后直接进行孤雌激活和培养。结果发现,15%EG处理2
(,O.05);15%ED处理2
其囊胚率(15.1%)显著低于对照组(,o.05);用15%DMSO处理2min组的卵裂率和囊
胚率(85.9%和11.3%)显著低于对照组(p0.05);所有处理5min组的卵裂率和囊胚率
min
均显著低于对照组(p(o.
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