猪囊尾蚴slc0未知功能分子在毕赤酵母中的表达与定位研究.pdfVIP

摘 要 SLClO是以绦虫保守的反式剪接引导序列为基础，通过RT_PcR从猪囊尾蚴中克隆出来的一个 个内含子组成。本试验旨在选择巴斯德毕赤酵母表达系统(尸衲胁pⅢfD廊Exp∞ssionsystem)在体 外表达猪囊尾蚴SLClO蛋白，并进行组织定位，研究其在虫体中的功能，挖掘其应用潜力，为更进 用＆口R 型选择培养基MD上生长出的转化子，采用G418浓度梯度进行筛选，获得的高拷贝重组菌株，用 物进行分析。结果表明，sLclO蛋白基冈在毕赤酵母中成功表达，表达产物的分子量为18ku左右， 用亲和层析纯化的重组蛋白作为包被抗原进行ELIsA检测，发现70份囊尾蚴阴性血清和75份囊尾 蚴阳性血清都不与其发生反应，说明sLcl0重组蛋白不能被人囊虫阳性血清所识别，不具有免疫反 应性。将纯化的sLClO重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体，进行免疫组织化学研究。试验证明，sLclO 天然蛋白主要分布在除猪囊尾蚴头节以外的囊壁内部。因此预言，SLClO蛋白为非分泌型结构蛋白， 与诱导宿主产生抵抗囊尾蚴感染的免疫应答无关。 关键字： 猪囊尾蚴，sLclO基因，毕赤酵母，免疫组织化学 Abstract An unl【